羊源产志贺毒素大肠杆菌噬菌体P762的生物学特性及解聚酶的研究.pdf

本研究由国家自然科学基金项目(U1803109)、江苏省重

点研发计划项目(BE2019304)、国家重点研发计划子项

目(2018YFC1602500)资助。

ThisstudywassupportedbygrantsfromtheNational

NaturalScienceFoundationofChina(U1803109),Key

researchanddevelopmentplanofJiangsuprovince

(BE2019304)andNationalKeyRDProgramofChina

(2018YFC1602500).

目录

摘要I

ABSTRACTV

本研究目的意义IX

第一篇文献综述1

第一章产志贺毒素大肠杆菌的研究进展1

1产志贺毒素大肠杆菌的发现1

2产志贺毒素大肠杆菌的流行病学2

3STEC致病相关毒力因子3

3.1志贺毒素3

3.2紧密黏附素和肠溶血素6

参考文献8

第二章噬菌体的研究进展15

1噬菌体种类15

1.1按照结构形态分类15

1.2按照生命周期分类16

1.3按遗传物质分类17

2噬菌体基因组18

3噬菌体应用18

3.1作为生物实验工具18

3.2噬菌体疗法18

3.3噬菌体衍生酶制剂19

3产志贺毒素大肠杆菌噬菌体的研究进展20

3.1Stx噬菌体与STEC20

3.2在食品方面的应用21

第二篇研究内容27

第三章羊源产志贺毒素大肠杆菌的毒力因子检测和强弱毒株评估27

1材料和方法28

1.1实验材料28

1.2STEC亚型分型及毒力基因检测29

1.3体外模型vero细胞评估Stx毒性作用29

2结果30

2.1STEC分型及毒力基因检测结果30

2.2STEC菌株Vero细胞毒性和溶血活性检测结果30

3讨论34

4本章小结35

参考文献36

第四章羊源产志贺毒素大肠杆菌噬菌体的分离和生物信息学分析39

1材料和方法40

1.1实验材料40

1.2噬菌体分离、纯化与富集42

1.3噬菌体P762基因组提取43

1.4P762基因组测序43

1.5P762基因组注释分析44

1.641株同属噬菌体泛基因组分析44

1.741同属噬菌体尾丝蛋白序列分析44

2结果44

2.1噬菌体的分离、纯化与富集44

2.2噬菌体P762的基因组测序结果44

2.3噬菌体P762的基因组注释结果45

2.4泛基因组分析结果46

2.5尾丝蛋白序列分析47

3讨论48

4本章小结49

参考文献50

第五章噬菌体P762的生物学特性及体外抑菌实验53

1材料和方法54

1.1实验材料54

1.2噬菌体效价的测定54

1.3噬菌体宿主谱的测定54

1.4噬菌体的电镜观察54