生物质谱分析技术.ppt

优点：a).可以实现多级串联质谱技术；b).结构紧凑。缺点：a).动态范围窄，不适合用于定量分析；b).存在空间电荷效应和离子-分子反应；c).CID过程中的碰撞能量大小不能确定；d).多个仪器参数影响质谱中离子的分布，如：活化能、捕获时间、检测器条件等。应用:a).台式的GC/MS,LC/MS/MS;b).目标化合物的筛选;c).气相离子化学研究.d).肽序列测定傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(Fouriertransformioncyclotronresonancemassspectrometer,FTICRMS)优点:a).是目前分辨率最高的质谱仪,?1000,000;b).可实现多级串联质谱分析,msn;c).可以与脉冲离子化电离技术联用,如:MALDI;d).是目前蛋白质和肽测序中顶端质谱仪;e).质量稳定性好;f).可实现气相离子-分子反应.缺点:a).有限的动态范围;b).存在空间电荷效应和离子-分子反应;c).存在Artifact峰;d).多个仪器参数影响质谱图的分布,如:活化能,捕获时间,检测条件等;e).CID谱与碰撞能，碰撞气及其他仪器参数有关．应用:a).生物大分子的分析；b).有机小分子分析；c).离子化学研究；e).可以和各种电离技术联用。飞行时间质谱仪(Time-of-flightmassspectrometer)m为离子的质量，q为离子所带的电荷，L为离子飞行的距离，v为离子的飞行速度，V为离子的加速电压，z为离子所带的电荷数，e微电子的电量。质谱分析原理质谱分析法是通过对被测样品离子的质荷比的测定来进行分析的一种分析方法。被分析的样品首先要离子化，然后利用不同离子在电场或磁场的运动行为的不同，把离子按质荷比（m/z）分开而得到质量图谱，通过样品的质量图谱和相关信息，可以得到样品的定性定量结果。2151911年:??世界第一台质谱装置（J.J.?Thomson）40年代:??用于同位素测定和无机元素分析?70年代：?计算机引入?460年代：?研究GC-MS联用技术?350年代：?开始有机物分析（分析石油）?质谱发展史生物质谱的发展80年代：快原子轰击电离，基质辅助激光解吸电离，电喷雾电离，大气压化学电离质谱技术因解决科学前沿难题屡次获得诺贝尔奖：1906年，Thompson.J.J（发明质谱技术）；1922年，AstonF.W（利用质谱仪发现非放射性同位素）；1980年，PaulW.（发明离子阱原理与技术）；1996年，CurlR.F/SroalleyR.E.等（用质谱仪观测到激光轰击下产生的碳60）；2002年美国科学家约翰.芬恩与日本科学家田中耕一由于发明了对生物大分子的质谱分析方法而获得了诺贝尔化学奖。因为该方法解决了生物大分子“是什么”的问题。质谱仪的示意图数据处理系统离子检测器质量分析器离子源蛋白质产生离子按离子的质量与电荷比分离离子离子转换成电信号控制整个质谱仪高斯状峰棒状峰质谱工作流程离子检测器加热进样直接进样进样系统电子轰击化学电离场致电离激光快原子轰击离子源单聚焦双聚焦飞行时间四极杆质量分析器进样系统：按电离方式的需要，将样品送入离子源的适当部位，分为加热进样和直接进样。01离子源：用来使样品分子电离生成离子02质量分析器：利用电磁场的作用将来自离子源的离子束中不同质荷比的离子按空间位置，时间先后或运动轨道稳定与否等形式进行分离03离子检测器：用来接受、检测和记录被分离后的离子信号04质谱的构造气体进样液体进样固体进样进样系统电子轰击电离（EI）化学电离（CI）快原子轰击（FAB）表面增强激光解吸电离(SELDI)技术基质辅助激光解吸电离（MALDI）电喷雾电离（ESI）010203040506离子源电子轰击(Electron