伪狂犬病毒不同基因缺失毒株的鉴定及其小鼠致病性研究.pdf

本研究由国家现代农业产业技术体系专项（CARS-35）

和国家重点研发计划（2016YFD0500105）资助

ThisstudywassupportedbytheChinaAgriculture

ResearchSystem(CARS-35)andNationalKeyProgram

ofResearchandDevelopmentofChian

(2016YFD0500105)

目录

目录

摘要I

ABSTRACTIII

研究目的与意义V

第一章猪伪狂犬病研究进展概述1

1历史1

2病原学2

2.1分类2

2.2分子生物学特征2

2.2.1病毒基因组3

2.2.2病毒蛋白及功能3

2.3致病机制6

3诊断7

3.1血清学检测8

3.2分子生物学检测9

3.2.1聚合酶链式反应（Polymerasechainreaction，PCR）9

3.2.2PCRRT-qPCR9

实时荧光定量（）

3.2.3微滴数字PCR（dropletdigitalPCR，ddPCR）9

3.2.4DNA芯片10

4免疫预防10

4.1灭活疫苗10

4.2弱毒疫苗11

4.3核酸疫苗12

4.4基因重组疫苗12

参考文献13

第二章伪狂犬病毒基因缺失株鉴定与生长特性测定27

1材料与方法28

1.1材料28

1.1.1病毒、细胞28

1.1.2试剂28

i

目录

1.2方法28

1.2.1病毒增殖28

1.2.2病毒滴度测定29

1.2.3病毒核酸提取29

1.2.4PCR鉴定缺失基因30

2结果32

2.1基因缺失毒株的PCR鉴定32

2.2病毒空斑形态观察34

2.3病毒滴度测定35

3讨论35

4本章小结36

参考文献37

第三章伪狂犬病毒基因缺失株对小鼠致病性研究41

1材料与方法42

1.1材料42

1.1.1病毒、细胞、试验动物42