锌指蛋白对24-表油菜素内酯诱导增强桃果实抗冷性调控机制的研究.pdf

目录

摘要I

ABSTRACTIII

缩略词VII

第一章文献综述1

1果蔬冷害1

1.1果蔬冷害的产生1

1.2果蔬冷害发生的机理2

1.2.1细胞膜代谢异常2

1.2.2细胞壁代谢异常3

1.2.3氧化胁迫3

1.2.4能量代谢紊乱4

1.2.5糖代谢紊乱4

1.2.6乙烯代谢失调4

1.2.7冷害发生的分子机理5

2油菜素甾醇在调控采后果蔬冷害的作用6

2.1油菜素甾醇生成和代谢6

2.2油菜素内酯信号转导8

2.3油菜素内酯调控冷害的机理9

3锌指蛋白对冷害的调控作用10

3.1锌指蛋白概述10

3.2C2H2型锌指蛋白在调控植物冷害中作用10

3.3GATA型锌指蛋白在调控植物冷害中作用12

3.4CCCH型锌指蛋白在调控植物冷害中作用13

4立题背景及主要研究内容14

4.1立题背景14

4.2主要研究内容14

4.3本研究技术路线15

第二章24-表油菜素内酯处理对桃果实采后品质影响及冷相关代谢和锌指蛋白

的筛选16

1材料与方法17

1.1材料与处理17

1.2品质指标的测定17

1.2.1电导率的测定17

1.2.2褐变指数17

1.2.3可溶性固形物含量17

1.2.4丙二醛含量18

1.3桃果实总RNA的提取和实时荧光定量检测18

1.4转录组的检测18

1.4.1样品转录本表达量18

1.4.2基于转录组筛选差异代谢和锌指蛋白18

1.5差异锌指蛋白生信分析19

1.6亚细胞定位分析19

1.7数据处理19

2结果与分析20

2.124-表油菜素内酯处理对贮藏和货架期品质的影响20

2.2RNA-seq测序质量及原始数据评估21

2.3基于转录组筛选关键代谢和信号途径22

2.4关键锌指蛋白的筛选24

2.5ZAT10、HDT1和GATA12的生信分析25

2.6ZAT10、HDT1和GATA12亚细胞定位和转录活性分析29

3讨论32

4本章小结34

第三章锌指蛋白PpZAT10调控桃果实冷信号传导途径和能量代谢的研究..35

1材料与方法36

1.1材料与处理36

1.2ATP、ADP、AMP和能荷测定36

+2+

1.3H-ATPase、Ca-ATPase、CCO、SDH酶活测定36

1.4桃果实总RNA的提取和实时荧光定量（qRT-PCR）检测37

1.5双荧光素酶实验37

1.6活体成像实验37

1.7酵母单杂实验38

1.8桃果实中瞬时超表达38

1.9酵母双杂交实验38

1.10双分子荧光互补实验39

1.11数据处理39

2结果与分析39

2.124-表油菜素内酯处理对PpZAT10和ICE-CBF-COR途径基因表达的影响39

2.2PpZAT10对PpICE1的调控作用41

2.2.1双荧光素酶实验分析PpZAT10对PpICE1的转录调控作用41

2.2.2烟草活体成像分析PpZAT10对PpICE1的转录调控作用41

2.2.3酵母单杂分析PpZAT10对PpICE1的转录调控作用42

2.3PpZAT10在桃果实中瞬时超表达42

2.4PpZAT10和PpECPP44蛋白互作和双分子荧光互补分析43

2.524-表油菜素内酯处理对能量代谢相关物质含量和能荷的影响45

+2+

2.624-表油菜素内