铜胁迫下葡萄叶片响应途径分析与VvATG6基因功能分析.pdf

目录

摘要I

ABSTRACTIII

缩略词表（Abbreviation）VII

第一章文献综述1

1植物铜胁迫研究进展1

1.1铜胁迫对植物生长发育的影响1

1.2植物对铜胁迫的防御机制3

2植物自噬研究进展6

2.1自噬的简介6

2.2植物自噬的分子机制8

2.3自噬在植物中的作用15

3植物ATG6蛋白的功能17

3.1ATG6参与自噬体形成17

3.2ATG6调控植物生长发育17

3.3植物ATG6响应胁迫过程18

3.4ATG6调控细胞死亡过程19

4研究目的和意义19

第二章高度铜胁迫下‘阳光玫瑰’葡萄叶片的响应途径解析21

1材料与方法23

1.1植物材料23

1.2CuSO溶液处理葡萄叶片23

4

1.3葡萄叶片表型观察23

1.4生理生化指标测定23

1.5转录组学测序与分析24

1.6实验数据的统计学分析24

2结果与分析24

2.1高度铜胁迫下葡萄叶片受到毒害作用24

2.2高度铜胁迫下差异基因的GO和KEGG富集分析26

2.3高度铜胁迫影响葡萄叶片铜离子的吸收、积累和外排过程28

2.4高度铜胁迫显著降低了葡萄叶片叶绿素含量和光合作用31

2.5葡萄叶片在高度铜胁迫下的耐受机制32

3讨论39

3.1高度铜胁迫对葡萄叶片产生明显损伤39

3.2葡萄叶片通过增强铜离子固定以及外排过程以抵抗高度铜胁迫...40

3.3葡萄叶片激活多种防御机制以应对高度铜胁迫41

3.4轻度和高度铜胁迫下葡萄叶片响应途径差异分析43

3.5结论44

第三章自噬关键基因VvATG6的功能分析45

1材料与方法47

1.1植物材料47

1.2载体与菌株47

1.3主要试剂和药品47

1.4目的基因的生物信息学分析48

1.5过表达载体构建48

1.6重组质粒转化农杆菌49

1.7亚细胞定位50

1.8拟南芥遗传转化与阳性植株筛选50

1.9烟草遗传转化与阳性植株筛选51

1.10转基因拟南芥耐铜性分析52

1.11转基因烟草耐铜性分析53

1.12酵母双杂筛选VvATG6互作蛋白53

1.13BiFC验证互作蛋白53

1.14实验数据的统计学分析54

2结果与分析54

2.1VvATG6生物信息学分析54

2.2VvATG6时空表达模式56

2.3VvATG6基因克隆57

2.4VvATG6蛋白的亚细胞定位58

2.5VvATG6耐铜性功能的验证58

2.6VvATG6蛋白的互作蛋白筛选66

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