菌种的制备和保藏.ppt

培养基组分的影响菌种的遗传基因型；

培养条件碳、氮比例无机盐菌丝生长与孢子繁殖的矛盾限制营养和干燥可以促进孢子生长碳、氮过于丰富有利于菌丝的生长不利于孢子繁殖金属离子：Mg、Fe、Cu、Mn、Na以及P促进孢子形成二、影响固体孢子质量的因素和控制孢子质量的方法通气量抗生素产生菌都是好氧菌通气量的控制通气量均匀一致包括各级种子培养采用质量一致的棉塞（试管、茄瓶、三角瓶等）二、影响固体孢子质量的因素和控制孢子质量的方法最适温度：指细胞新陈代谢活动的适宜温度。多数微生物能在24~37oC生长。有些菌的菌丝最适生长温度与生物合成抗生素的最适温度有所差异。可在生产的不同阶段控制不同的培养温度。5、培养温度的控制二、影响固体孢子质量的因素和控制孢子质量的方法6、培养室湿度的控制固体孢子培养要求适宜的空气湿度。湿度的变动会影响种子间的差异。另外需要同时考虑接种量和培养基的水分含量比如大米、小米等培养基质的含水量与菌丝生长有关。小米孢子含水量约为1：1；大米孢子含水量在24~27%为宜。菌体浓度（活菌体数）摇瓶种子的质量标准022）菌体生长阶段对数生长后期1.配制—接种—培养—接种或保存第3节摇瓶种子的制备摇瓶种子：从斜面种子接种入锥形瓶内的液体营养培养基中，在摇床上振荡培养得到的液体种子。01培养基组成首先要求菌体生长对所有营养成分的需要，该前提下培养基组成越丰富，所获得的菌体浓度越高影响摇瓶种子质量的因素及其控制摇瓶装量影响通气效果需要结合产生菌的耗氧特性和摇床的转速01摇床转速02影响摇瓶种子质量的因素及其控制03摇瓶在摇床中的位置04孢子接入量菌种是重要的生物资源，研究和选择良好的菌种保藏方法具有重要的意义。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定，确保菌种不死亡、不变异、不被污染，以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。一、菌种保藏的目的第4节菌种保藏二、菌种保藏的原理尽可能多的采用不同的手段保藏一些比较重要的微生物菌株首先应该挑选典型菌种的优良纯种来进行保藏，最好保藏它们的休眠体，如分生孢子、芽孢等。其次应人为地创造环境条件（如：干燥、低温和缺氧），使微生物长期处于代谢不活泼、生长繁殖受抑制的休眠状态。三、菌种保藏方法各种微生物由于遗传特性不同，因此适合采用的保藏方法也不一样。一种良好的有效保藏方法，首先应能保持原菌种的优良性状长期不变，同时还须考虑方法的通用性、操作的简便性和设备的普及性。低温是保藏菌种的重要因素之一一般微生物在-30oC时即停止生长低温处理菌种时要注意对细胞的损伤因为细胞外的培养基比细胞内物质结冰早可加保护剂甘油第五章菌种的制备和保藏5.1微生物的生长、繁殖5.2固体孢子的制备5.3摇瓶种子的制备5.4菌种保藏第1节微生物的生长、繁殖一、概述生长就是有机体的细胞组分与结构在量方面的增加。单细胞微生物：生长伴随着细胞数目的增加——繁殖霉菌：细胞生长并不一定伴随着个体数目的增加——生长，而非繁殖如菌丝细胞从生长到繁殖是一个由量变到质变的过程细菌的繁殖裂殖是细菌最普遍、最主要的生活方式孢子的产生方式：放线菌的繁殖通过形成无性孢子的方式进行繁殖，也可借菌体断裂片段繁殖。凝聚分裂形成凝聚孢子横膈分裂形成横膈孢子孢子囊形成孢囊孢子分生孢子厚壁孢子放线菌的孢子具有较强的耐干燥能力，但不耐高温，60~65oC处理10~15min即失去生活能力。极性生长放线菌的繁殖体以极性伸长方式进行生长通过顶端菌丝的延伸分化基内菌丝提供营养物质供气生菌丝生长孢子形成分枝菌丝分枝一般发生在坚硬细胞壁恢复可塑性时放线菌的生长方式2主要靠形成无性或有性孢子3测定群体的增加量——群体生长1霉菌的繁殖方式6直接法间接法5测定个体的生长没有实际应用价值。4微生物生长的测定计数器测定法细菌计数器或血球板计数器比浊法简便、快速涂片染色法将定体积的待测液均匀涂布在已知面积的载玻片上，经固定染色后计数又称为全数法直接法又称为活菌计数法01常用平皿菌落计数法——活菌计数02间接法测定生长曲线群体生长规律第2节固体孢子制备1固体孢子是生产种子的一种形式。2一般繁殖能力强、孢子数量多的菌种可用固体孢子进罐。3孢子进罐的优势：4孢子处于半休眠状态，细胞内的代谢活动降到最低点；5进种子罐后，所有个体都从同一水平起步生长，获得同步生长或接近同步生长。6另外，进罐前若将孢子在水中浸泡数小时有利于孢子快速发芽和同步生长7四环素生