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酵母菌发酵培养基的优化一、实验目的二、实验原理三、实验器材四、实验步骤五、实验结果掌握发酵培养基的配制方法学习比浊法测定发酵液菌浓的方法熟悉用正交试验优化发酵培养基的方法实验目的确定培养基的基本组成01确定所用原材料的种类02确定所用原材料的浓度配比关系03培养基的配制实验原理培养基优化原材料种类和浓度配比优化01单因素法(只是考虑单一变量对结果的影响)正交试验法均匀试验设计(只考虑试验点在试验范围内均匀散布的一种试验设计方法,试验次数少)02利用已经设计好的表格--正交表--来安排试验并进行数据分析的一种方法。01它是从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验,这些有代表性的点具备了“均匀分散,齐整可比”的特点,是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。02概念三、正交试验法基本工具——正交表记号:Ln(tm)L:正交表的符号n:表的行数(可安排试验的次数)t:表中的字码数(水平数)m:表的列数(最多可安排因素个数)L8(27)L9(34)L16(45)试验点分布均匀、整齐可比01任何一列中各字码(水平)都出现,且出现的次数相等02任何两列中各横行组成的数字对,包含着所有可能的数字对,且各种数字对出现的次数相等03正交表的特点四、比浊法测定发酵液菌浓细菌培养物在生长过程中,由于原生质含量的增加,会引起培养物混浊度的增高。细菌悬液的混浊度和透光度成反比、与光密度成正比,透光度或光密度可借助光电比浊计精确测出,因此可用光电比浊计测定细胞悬液的光密度(OD值),表示该菌在特定实验条件下的细菌相对数目,进而反映出其相对生长量。01.移液管、100ml锥形瓶、光电比浊计、灭菌锅、恒温摇床02.葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO403.酵母菌菌液实验器材实验步骤一、培养基的配制因素水平A葡萄糖/%B蔗糖/%C酵母提取粉/%DKH2PO4/%11.00.00.50.522.01.01.01.033.02.01.51.51.将葡萄糖、蔗糖、酵母提取粉、KH2PO4作为培养基的主要影响因素,每一因素设定3个水平,进行四因素三水平的正交试验,试验设计如下表2.按下表配制9组培养基于100ml锥形瓶中,每瓶25ml,因素A葡萄糖/%B蔗糖/%C酵母提取粉/%DKH2PO4/%OD值实验11(1.0)1(0)1(0.5)1(0.5)实验21(1.0)2(1)2(1)2(1)实验31(1.0)3(2)3(1.5)3(1.5)实验42(2.0)1(0)2(1)3(1.5)实验52(2.0)2(1)3(1.5)1(0.5)实验62(2.0)3(2)1(0.5)2(1)实验73(3.0)1(0)3(1.5)2(1)实验83(3.0)2(1)1(0.5)3(1.5)实验93(3.0)3(2)2(1)1(0.5)01锥形瓶培养基:标记,加棉塞、报纸包扎。1ml移液管2支121℃,灭菌20min02灭菌
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