转基因小鼠技术.pptVIP

小鼠的历史**1972年---小鼠遗传学的计算机数据库Jackson实验室设计了第一个哺乳动物遗传学计算机数据库1977年--Sanger测序法和同事WalterGilbert分享了1980年的诺贝尔化学奖---人类和小鼠基因组测序过程中的主要技术1982年--转基因小鼠小鼠的历史**16.1987-89年--第一只基因敲除小鼠MartinEvans，OliverSmithies和MarioCapecch领导的几个研究小组---2001获得了Lasker奖17.1996年--“百慕大法则”公共基因组序列数据18.1998年?--克隆鼠1997年克隆羊“多莉”诞生之后，夏威夷的一个小组培育出了第一批克隆鼠——“Cumulina”和她的姐妹们。15.1983年--PCRKaryMullis--1993年的诺贝尔奖小鼠的历史**19.1999年--小鼠基因组测序协会人类基因组三个主要测序中心（TheWellcomeTrustSangerInstitute,TheWhiteheadCenterforGenomeResearch和WashingtonUniversityGenomeSequencingCenter）成立了一个相互协作的小鼠基因组测序机构，取名为小鼠基因组测序协会（MouseGenomeSequencingConsortium,MGSC)20.2001年2月--人类基因组21.2001年6月--散弹法美国公司CeleraGenomics使用散弹法测得了用于销售的小鼠序列草图。散弹法是一种一次性测得基因组全序列的技术。小鼠的历史**2002年5月--16号染色体与已被分析的人类 21号染色体序列高度相似12002年8月--小鼠基因组物理图谱22002年12月?--小鼠基因组3小鼠基因组测序协会发表了一份高质量的小鼠基因组序列草图，并且同时对C57BL/6J小鼠株系做了分析。这个基因组大小约为2.5Gb，比人类基因组要小，预计的基因也少于30000个。约有40%的小鼠和人类基因组序列相高度似性，80%的人类基因在小鼠基因组中能找到相应的基因。同时还有不少文章对小鼠遗传组成的其它方面做了详细讨论。在日本RIKEN基因组科学实验室的努力下，很多相关的重要资源都能够被免费获取。4转基因小鼠技术的应用**基因表达调控、基因功能及发育调控作用的研究01基因工程定向育种02转基因动物生物反应器研制03人类疾病小鼠模型与基因治疗04药理学研究05器官移植06环境科学研究07基因表达调控、基因功能及发育调控作用的研究Hoxgene(同源异形盒基因）疾病基因学习与记忆基因生理周期基因基因表达有时空与组织的特异性；外源基因的表达受特异性有关顺式作用序列的调控；基因工程定向育种**向动物体转移外源基因并使之在动物体内表达，能够克服物种间固有的生殖隔离，实现动物育种之间遗传物质的交换。实质是将基因转移与传统育种方法结合，各取其精华，快速创造新的目的变异和固定扩展变异，从而快速培育出高产优质和抗逆动物品种。转基因羊、猪、鸡、鱼、鼠等0102**转基因小鼠技术

---转基因小鼠的构建李懿萍基因打靶的简易程序**胚胎干细胞（ES细胞）法**外源基因整合情况的可控性高可预先在细胞水平检测外源基因的拷贝数、定位、表达的水平及插入的稳定性外源基因导入ES细胞的方法多样，细胞鉴定及筛选方便优点：ES细胞系建立及培养困难维持ES细胞的未分化及多向分化潜能不易所得个体为嵌合体缺点：逆转录病毒感染法**主要是利用反转录病毒的长末端重复序列(LTR)区域具有转录启动子活性的特点,将外源基因连接到LTR下游进行基因重组后,再包装成为高滴度病毒颗粒,去直接感染受精卵或显微注入囊胚腔中,携带外源基因的反转录病毒DNA可以整合到宿主染色体上。逆转录病毒感染法**获得纯合体的转基因动物的机会少病毒载体构建复杂转入的外源基因的大小受到限制,10kb转入病毒自身基因的复制表达缺点优点由于反转录病毒的高效率感染和在宿主细胞DNA中的高度整合特性,大大提高基因转移的效率细菌质粒和噬菌体载体只能将目的基因运载至细菌中扩增和表达。病毒载体是较理想的真核基因工程载体体细胞核移植法**首先将目标基因转移到体外培育的动物体细胞中,筛选出阳性转基因细胞并进行繁殖,制备出供移