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第34讲克隆技术;;;想一想

1．植物细胞表现出全能性的前提条件是什么？

【提示】必须是离体的植物器官、组织或细胞(外植体)。;二、动物的克隆

1．动物细胞的培养

从动物体中取出相关的组织，将它分散成___________的悬浮液，然后在人工控制的培养条件下，使这些细胞得以生存，并保持生长、分裂(繁殖)乃至接触抑制和有规律的衰老、死亡性能等生命活动现象。

2．动物组织培养

动物组织在体外及人工条件下维持生活状态或生态特性。动物组织培养过程中可以伴随___________。;3．原代培养和传代培养

(1)原代培养

从机体取出后立即进行的细胞、组织培养。

(2)传代培养

将__________的细胞分成若干份,接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。

4．细胞系和细胞株

(1)细胞系：指可连续传代的细胞。原代培养物在__________时就成为细胞系。

(2)细胞株：从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，一般具有恒定的染色体组型、____________、病毒敏感性和__________等。;受精卵;(2)动物难以克隆的根本原因

在动物的个体发育过程中，细胞分化使得细胞发生了基因的差异表达，细胞基因组中基因的活动很不完全。

(3)细胞核移植实验和动物的克隆繁殖

①核移植：利用一个细胞的________来取代另一个细胞中

的细胞核，形成一个_________________。

②动物的克隆繁殖;;(4)在生物体内细胞并没有表现出全能性的原因：基因在特定的时间和空间条件下选择性表达，细胞分化为不同的组织、器官。

(5)全能性表达的程度(由易到难)

①受精卵＞生殖细胞＞体细胞。

②植物细胞＞动物细胞。;2．植物组织培养过程;特别提醒

(1)脱分化过程实际上是有丝分裂过程，该过程不需要光。

(2)再分化过程诱导愈伤组织分化为幼苗或胚状体结构，该过程需要光。

(3)胚状体继续分裂分化成完整植株，该过程需要光。

(4)生长素和细胞分裂素比例不同,植物组织培养的结果不同。;3．植物细胞工程;特别提醒

(1)原生质体的获得：需用纤维素酶和果胶酶混合液除去植物的细胞壁。

(2)原生质体培养是植物细胞工程技术发展的基础。;;【解析】植物组织培养中通过调节营养物质和植物生长调节剂的配比可以实现器??发生和形态建成；有的植物(如风信子)可以在愈伤组织的基础上直接发育出花器官。

【答案】A;变式训练

下列有关植物细胞工程的叙述，错误的是()

A．通过培养植物细胞，可获取大量的细胞代谢产物

B．在培养基中加入不同浓度的氯化钠溶液，可诱发和筛选出抗盐植株

C．原生质体培养结合基因工程技术，可获得具有特定性状的新植株

D．由于植物细胞具有全能性，同种植物的不同基因型个体，它们细胞全能性的表达程度相同;解析：选D。如果植物细胞培养仅培养到愈伤组织阶段，则可利用愈伤组织增殖能力强、种类单一等特点，生产细胞代谢产物，A正确；改变外界条件，既可进行筛选也可进行诱变，B正确；基因工程可以定向改造生物性状，C正确；对于同种植物的不同基因型的个体，它们的细胞会发生分化，而细胞分化的程度不同，直接导致细胞全能性的表达程度不同，D错。;考点二;4．应用

(1)生产病毒疫苗、单克隆抗体、干扰素等。

(2)利用动物细胞培养技术中的细胞贴壁生长和接触抑制的特点，可用烧伤病人自己的健康皮肤细胞培养出大量的自身薄层皮肤细胞，以供植皮所需。

(3)培养的动物细胞用于检测有毒物质，判断物质的毒性。;5．原代培养和传代培养;6.细胞系和细胞株;(2013·宁波模拟)下列关于动物细胞培养的说法正确的是()

A．连续细胞系不具有异倍体核型

B．动物组织细胞间的胶原纤维可用纤维素酶水解

C．原代培养细胞、有限细胞系比无限细胞系、肿瘤细胞更容易克隆

D．提高动物细胞克隆形成率需要以滋养细胞支持生长及激素刺激等条件;【解析】连续细胞系大多数具有异倍体核型；动物组织细胞间的胶原纤维的主要成分是胶原蛋白，可以用胰蛋白酶酶解，不能用纤维素酶水解；在进行细胞克隆时，原代细胞、有限细胞系通常不如无限细胞系、转化或肿瘤细胞更容易克隆。

【答案】D;变式训练

下列关于动物细胞克隆培养法的叙述，错误的是()

A．必须把一个单细胞从群体中分离出来单独培养

B．可利用胰岛素刺激来提高细胞克隆形成率

C．在实际操作中，原代细胞比肿瘤细胞更容易克隆

D．细胞克隆的最主要用途之一是从普通细胞系中分离出缺乏特殊基因的突变细胞系

解析：选C。动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶分解组织细胞间蛋白质的联系，使其分散成单个细胞；肿瘤细胞具有无限增殖的特点，原代培养的细胞培养到第10代时，大部分细胞出现生长停滞的现象；细胞克隆过程中，传代培养中部分细胞会发生癌变，有些细胞能无