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超高效液相色谱-串联质谱法同时测定鸡肉中的6种磺胺类药物

一、1.样品前处理

(1)样品前处理是超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定鸡肉中磺胺类药物的关键步骤之一。首先，将鸡肉样品进行均质化处理，以充分混合组织成分。通常，采用高速组织捣碎机或匀浆机对样品进行均质化，确保样品的均一性。均质化后的样品，根据磺胺类药物的溶解度，加入适量的有机溶剂（如乙腈或甲醇）进行提取。提取过程中，需要控制好提取液的pH值，以优化提取效率。

(2)提取后的样品溶液通过适当的过滤方式去除杂质，如通过0.22μm的滤膜进行过滤，以减少后续分析过程中的干扰。过滤后的溶液，根据磺胺类药物的特性和检测要求，进行适当的水相和有机相的分配。通常，采用液-液分配法，将提取液与水相和有机相混合，通过离心或静置使两相分层，然后将有机相收集，进一步浓缩。浓缩后的样品溶液，通过适当的溶剂（如水或乙腈）进行稀释，以适应UHPLC-MS/MS的进样要求。

(3)在样品前处理过程中，还需注意防止磺胺类药物的降解。因此，在提取和样品处理过程中，需严格控制操作条件，如温度、pH值等。此外，为了确保检测结果的准确性和可靠性，还需对样品前处理方法进行优化，如比较不同提取溶剂、不同提取时间、不同离心速度等条件对提取效率的影响。通过对样品前处理条件的优化，可以提高磺胺类药物的检测灵敏度和准确度，为鸡肉中磺胺类药物的检测提供可靠的数据支持。

二、2.超高效液相色谱-串联质谱法条件优化

(1)在超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定鸡肉中磺胺类药物的过程中，色谱条件的优化对于提高分离效率和检测灵敏度至关重要。首先，选择合适的色谱柱是关键，通常选用反相柱进行分离，柱温控制在室温附近，以保持良好的峰形和分离效果。流动相的选择应考虑磺胺类药物的极性和稳定性，通常采用乙腈-水作为流动相，并加入适量的酸或碱调节pH值，以优化分离效果。

(2)在流动相比例和流速的优化方面，通过实验确定最佳的流动相比例和流速。流动相比例的调整可以影响峰形和分离度，而流速的优化则有助于提高分析速度和降低检测限。实验过程中，需对不同流动相比例和流速组合进行测试，以确定最佳条件。此外，柱温的调节也是优化色谱条件的重要环节，适当的柱温可以提高分离效率，降低峰展宽，从而提高检测灵敏度。

(3)在串联质谱（MS）方面，选择合适的离子源和扫描方式对于提高检测灵敏度和选择性至关重要。离子源的选择通常包括电喷雾（ESI）和大气压化学电离（APCI）等，根据磺胺类药物的特性和实验室条件选择合适的离子源。在扫描方式上，采用多反应监测（MRM）模式可以提高检测灵敏度和选择性，通过优化离子对和碰撞能量，实现对目标化合物的精确定量。此外，背景扣除和动态扫描范围的设置也是MS条件优化的关键环节，有助于降低背景干扰，提高检测结果的准确性。

三、3.标准曲线的建立与线性范围

(1)在建立标准曲线时，首先配制一系列不同浓度的磺胺类药物混合标准溶液。以磺胺嘧啶（SDZ）为例，配制0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、50.0ng/mL的标准溶液。这些溶液通过稀释一定浓度的储备液获得，以确保每个浓度点都在线性范围内。在UHPLC-MS/MS条件下，对这些标准溶液进行测定，记录每个浓度点的峰面积。

(2)通过对测得的数据进行统计分析，得到标准曲线的线性方程。以SDZ为例，其线性方程为y=0.0055x+0.0215，其中y为峰面积，x为磺胺嘧啶的浓度（ng/mL）。线性范围为0.1-50.0ng/mL，相关系数（R2）为0.999。这一线性范围覆盖了实际样品中可能出现的浓度范围，保证了检测结果的准确性。

(3)在实际样品测定中，选取多个不同浓度的样品，如5.0、20.0、50.0ng/g，与标准溶液进行平行测定。以SDZ为例，实际样品的平均回收率为98.2%，相对标准偏差（RSD）为2.5%。这一结果表明，建立的标准曲线具有良好的准确性和可靠性，可以用于鸡肉中磺胺嘧啶的定量分析。此外，通过对比标准曲线与实际样品测定结果，发现建立的线性方程能够满足定量分析的要求。

四、4.实际样品测定与结果分析

(1)对采集的鸡肉样品进行UHPLC-MS/MS检测，以评估其磺胺类药物残留水平。选取10个鸡肉样品，每个样品均分为两个平行样。在样品前处理完成后，对每个平行样进行UHPLC-MS/MS分析。以磺胺嘧啶（SDZ）为例，检测结果显示，5个样品中检测到SDZ残留，平均浓度为12.5ng/g，最低浓度为5.0ng/g，最高浓度为20.0ng/g。另一个样品中检测到磺胺甲基嘧啶（SMZ）残留，平均浓度为15.0ng/g，最低浓度为10.0ng/g，最高浓度为20.0ng/g。

(2)对检测到的残