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亲水作用色谱-串联质谱法测定动物源食品中10种氨基糖苷类药物的残留量

一、引言

(1)随着养殖业的发展，动物源食品在人们日常生活中占据了越来越重要的地位。然而，为了提高动物生长速度和预防疾病，部分养殖户可能违规使用氨基糖苷类药物。这类药物具有抗菌作用，但长期摄入可能导致人体产生耐药性，并对人体健康造成潜在风险。因此，准确测定动物源食品中氨基糖苷类药物的残留量对于保障食品安全和人类健康具有重要意义。据统计，我国每年因食品药物残留问题导致的食品安全事件超过数百起，涉及消费者数十万人。

(2)亲水作用色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）是一种高效、灵敏的检测技术，广泛应用于食品、药品、环境等领域的分析。该方法结合了亲水作用色谱的高分离能力和串联质谱的高灵敏度，能够实现复杂样品中目标物的快速、准确检测。近年来，HPLC-MS/MS技术在食品安全检测领域得到了广泛应用，尤其在检测动物源食品中残留药物方面表现出色。例如，在2019年欧洲食品安全局发布的食品安全风险监测报告中，HPLC-MS/MS方法被用于检测动物源食品中的氨基糖苷类药物残留，检测限达到0.01-0.05μg/kg。

(3)本研究旨在建立一种基于亲水作用色谱-串联质谱法的动物源食品中10种氨基糖苷类药物残留量检测方法。该方法以高效液相色谱（HPLC）分离样品中的目标药物，并通过串联质谱（MS/MS）进行检测。该方法具有以下特点：检测限低、灵敏度高等。在实际应用中，该方法已成功应用于多个动物源食品样品的检测，如鸡肉、猪肉、牛肉等。通过对这些样品的检测，我们发现在部分样品中存在氨基糖苷类药物残留，残留量最高可达2.5μg/kg。这些数据表明，建立一种可靠的氨基糖苷类药物残留检测方法对于保障食品安全至关重要。

二、实验部分

(1)实验材料主要包括动物源食品样品、氨基糖苷类药物标准品、色谱柱、质谱仪、高效液相色谱仪、超声波清洗器、涡旋混合器、离心机、氮吹仪等。动物源食品样品包括鸡肉、猪肉、牛肉等，均来自正规市场。氨基糖苷类药物标准品包括链霉素、庆大霉素、阿米卡星、奈替米星、新霉素等，均购自国家标准物质中心。色谱柱选用C18反相色谱柱，质谱仪选用三重四极杆质谱仪，高效液相色谱仪选用岛津LC-20AT高效液相色谱仪。

(2)样品前处理步骤如下：首先，将动物源食品样品进行匀浆处理，加入一定量的提取溶剂（如乙腈）进行提取。提取液经过涡旋混合后，以4000r/min离心10分钟，取上清液。然后，将上清液通过C18固相萃取小柱进行净化，依次用甲醇和去离子水进行洗脱，收集目标物。收集的洗脱液在氮吹仪上吹干，残渣用流动相复溶于适当体积的溶液中。实验过程中，对提取溶剂、洗脱溶剂和流动相进行精确配制，确保实验结果的准确性。

(3)色谱条件：流动相为乙腈-水，梯度洗脱程序为0-5分钟，乙腈比例从10%升至30%；5-10分钟，乙腈比例从30%升至50%；10-12分钟，乙腈比例保持50%；12-15分钟，乙腈比例从50%降至10%；15-18分钟，乙腈比例保持10%。流速为0.8mL/min，柱温为30℃。质谱条件：电离方式为电喷雾电离（ESI），扫描方式为多反应监测（MRM），扫描范围为100-600m/z。碰撞能量根据各目标物进行优化。实验过程中，对色谱柱和质谱仪进行定期维护和校准，确保实验结果的可靠性。

三、结果与讨论

(1)本研究建立的HPLC-MS/MS方法对10种氨基糖苷类药物在动物源食品中的残留量检测具有较好的线性关系，相关系数R2均大于0.99。在检测限范围内，该方法对链霉素、庆大霉素、阿米卡星、奈替米星、新霉素等药物的定量下限分别为0.01、0.02、0.005、0.01、0.02μg/kg。在实际样品检测中，对100份动物源食品样品进行检测，其中鸡肉样品检出率最高，达90%，其次是猪肉和牛肉，检出率分别为80%和70%。检出样品中，氨基糖苷类药物残留量最高为2.5μg/kg，最低为0.05μg/kg。

(2)在讨论中，我们分析了不同动物源食品中氨基糖苷类药物残留量的影响因素。结果表明，养殖过程中饲料添加剂的使用、饲养环境、养殖技术等因素均对药物残留量有显著影响。以鸡肉为例，饲料中添加的抗生素类药物残留量占总残留量的60%以上，而饲养环境中的污染源如土壤、水源等对残留量的贡献较小。此外，本研究还发现，不同品种的动物源食品中氨基糖苷类药物残留量存在差异，其中肉鸡的残留量显著高于其他动物源食品。

(3)为了降低动物源食品中氨基糖苷类药物残留风险，本研究提出以下建议：首先，加强对养殖环节的监管，严格执行饲料添加剂的使用规范，限制抗生素类药物的使用；其次，优化饲养环境，减少土壤、水源等污染源的影响；再次，推广绿色养殖技术，如发酵床养殖、生态养殖等，减少药物的使