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夹心Ct实时定量PCR筛选单拷贝T-DNA植株技术的开发及应用.pdf

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摘要

农杆菌介导的遗传转化是植物转基因的主要手段。然而,农杆菌介导的转基因往

往伴随着多拷贝T-DNA和载体骨架序列的整合,这会导致基因表达不稳定,使基因

功能分析复杂化。因此,高效鉴定单拷贝T-DNA转基因植株是作物转基因育种以及

植物基因功能分析的重要目标。

尽管有多种方法用于筛选单拷贝T-DNA植株,但除了耗时、操作繁琐的Southern

杂交外,目前没有被广泛接受的方法用于高效鉴定单拷贝T-DNA植株。实时定量PCR

操作简单、经济且灵敏度高,但实时定量PCR对拷贝

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