1.2.2 微生物的选择培养与计数（原卷版）.docx

第一章发酵工程

第2节微生物的培养技术及应用

（课前+课中+课后，三案一体）

第2课时微生物的选择培养和计数课前案

【预习新知】

一、选择培养基

1.实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件（包括等），同时抑制或阻止的生长。

2.选择培养基：在微生物学中，允许微生物生长，同时其他种类微生物生长的培养基。

二、微生物的选择培养

1.培养基：配制相应的选择培养基。

2.样品处理：对样品进行充分稀释。

3.接种方法：稀释涂布平板法。

4.培养（细菌）：将平板，放入的恒温培养箱，培养d。

三、微生物的数量测定

1.稀释涂布平板法

（1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单一菌落，来源于样品稀释液中的。通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。

（2）计数原则：平板上菌落数应在个，同一稀释度下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值。

（3）不足：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落数往往比活菌的实际数目。

2.显微镜直接计数法

（1）计数工具：显微镜、

（2）不足：由于计数结果是的总和，所以一般比活菌的实际数目。

四、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

1.原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成的微生物才能分解尿素。利用以为唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离的细菌。

2.步骤

【预习自测】

1.因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离。()

2.测定土壤中细菌总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同。()

3.在同一稀释度下，如果得到了两个或两个以上菌落数目在30-300的平板，泽尔说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数。（）

4.牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的菌落数目，说明选择培养基已筛选出一些菌种。（）

第2课时微生物的选择培养和计数课中案

【导】

自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合的菌群中不是优势种群时，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。该怎么办呢?

【思】

1.怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养基的原理？

2.如何通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物？

3.测定微生物数量的常用方法有哪些？

【议】

1.你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？

2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？

3.为什么只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长？

4.设计对照实验：如何验证所用的选择培养基没有受到污染？

5.在初次实验中，对于稀释的范围没有把握，怎样做才能保证从中选择出菌落数在30～300的平板进行计数？

6.甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。

(1)甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230，该同学的统计结果是否真实可靠？为什么？

(2)乙同学在该浓度下涂布了3个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学将21舍去，然后取平均值。该同学对实验结果的处理是否合理？为什么？

【展】学生展示讨论结果

【评】

1.稀释涂布平板法操作步骤

2.对比平板划线法和稀释涂布平板法

【检】引导学生总结本节课内容

【练】完成课后案

第2课时微生物的选择培养和计数课后案

1．幽门螺杆菌（Hp）生存于人体胃的幽门部位，能够引起慢性胃炎等胃部疾病。尿素在酶的作用下分解产生NH3和CO2。体检时常用14C呼气试验来诊断测试者是否感染Hp，测试者口服含14C标记的尿素胶囊，一段时间后通过测定呼出的气体是否含有14CO