2025届高考生物二轮复习【第1部分】大概念整合6必考大题突破系列05生物技术与工程类解题技巧与答题规则教案(新教材).docxVIP

(2022·山东卷)某种类型的白血病由蛋白P引发，蛋白UBC可使P被蛋白酶识别并降解，药物A可通过影响这一过程对该病起到治疗作用。为探索药物A治疗该病的机理，需构建重组载体以获得融合蛋白FLAG-P和FLAG-P△。P△是缺失特定氨基酸序列的P，FLAG是一种短肽，连接在P或P△的氨基端，使融合蛋白能与含有FLAG抗体的介质结合，但不影响P或P△的功能。

(1)为构建重组载体，需先设计引物，通过PCR特异性扩增P基因。用于扩增P基因的引物需满足的条件是__________________________________。为使PCR产物能被限制酶切割，需在引物上添加相应的限制酶识别序列，该限制酶识别序列应添加在引物的______(填“3′端”或“5′端”)。

(2)PCR扩增得到的P基因经酶切连接插入载体后，与编码FLAG的序列形成一个融合基因，如图甲所示，其中“ATGTGCA”为P基因编码链起始序列。将该重组载体导入细胞后，融合基因转录出的mRNA序列正确，翻译出的融合蛋白中FLAG的氨基酸序列正确，但P基因对应的氨基酸序列与P不同。据图甲分析，出现该问题的原因是_________________________________________。

修改扩增P基因时使用的带有EcoRⅠ识别序列的引物来解决该问题，具体修改方案是________________________________________。

图甲

(3)融合蛋白表达成功后，将FLAG-P、FLAG-P△、药物A和UBC按照图乙中的组合方式分成5组。各组样品混匀后分别流经含FLAG抗体的介质，分离出与介质结合的物质并用UBC抗体检测，检测结果如图丙所示。已知FLAG-P和FLAG-P△不能降解UBC，由①②③组结果的差异推测，药物A的作用是______________________________________________________________；

由②④组或③⑤组的差异推测，P△中缺失的特定序列的作用是_____________________________________________________________。

图丙

(4)根据以上结果推测，药物A治疗该病的机理是___________________

_____________________________________________________________。

(1)两种引物分别与两条模板链3′端的碱基序列互补配对5′端(2)在转录出的mRNA中，限制酶识别序列对应的最后两个碱基与P基因对应的第一个碱基构成一个密码子，导致读码框改变，翻译出的氨基酸序列改变在EcoRⅠ识别序列前后增加碱基，使其碱基数目加上FLAG的碱基数目为3的倍数(3)促进UBC与FLAG-P的结合P△中缺失的特定序列是与UBC结合的关键序列(4)药物A促进UBC与FLAG-P的结合，从而促进蛋白P被蛋白酶识别并降解，达到治疗的目的

(1)能与P基因/目的基因母链的一段碱基序列互补配对，短单链核酸(2分)5′端(2分)

以下采分点缺一不可(0分/2分)：①P基因/目的基因，必须点出来；②碱基互补配对/互补配对，必须点出来；③5′端不能落下，否则不得分；

(2)P基因编码链的第一个碱基与EcoRⅠ识别序列的最后两个碱基编码一个氨基酸，导致mRNA被错位读取(2分)在引物中的EcoRⅠ识别序列3′端添加3n＋1个碱基(2分)

第1个小空描述清楚，答出意思即可，常见答案有三类：①P基因的碱基序列原来是……现在变成了……/起始序列是……现在是……；②EcoRⅠ的碱基数目不是3的倍数；③P基因在转录时碱基错位/移码/读取错误均可，但氨基酸错位/基因错位不得分。

第2个小空描述清楚添加碱基的数目及位置即可得分，常见答案：①在EcoRⅠ识别序列的3′端/右端/下游/末端添加3n＋1个碱基；②在P基因的5′端/左端/上游/前端添加3n＋1个碱基；③在P基因和EcoRⅠ之间添加……。特别注意，若写成碱基对则不得分。

(3)增强FLAG-P与UBC的结合(1分)参与P与UBC的结合(1分)

以下采分点缺一不可(0分/1分)：①增强/加强/提高/强化/促进，必须点明一个向上的动词；②FLAG-P/P与UBC，专有名词写错不得分；③作用/结合，识别不得分；④与UBC的结合有关/是UBC的结合位点/是UBC的受体均可；

(4)药物A通过增强/加强/促进/提高P与UBC的结合/作用来促进P/复合物降解(2分)

以下4个采分点缺一不可(0分/2分)：①增强/加强/促进/提高，必须体现一个正向的方向才可，引导/让/使，都不得分；②必须点出P与UBC，P蛋白/FLAG-P和UBC蛋白都可以