食品中铜绿假单胞菌检测.ppt

设备和仪器?玻璃器具：所有玻璃器皿使用前需121℃高压蒸汽灭菌15分钟?恒温培养箱：36℃±1℃?紫外灯：波长应为360±20nm?滤膜：直径47mm，微孔径为0.45μｍ（处理方法：如滤膜未经灭菌，则使用前需先将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水，置于沸水浴中煮沸灭菌3次，每次15min。前两次煮沸后需更换水，用蒸馏水洗涤2次～3次，以除去残留溶剂。建议使用一次性无菌滤膜。）?显微镜：10×～100×?冰箱：0℃～8℃操作步骤-水样过滤01在100级的洁净工作台进行过滤操作。02首先用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分，03将粗糙面向上，贴放在已灭菌的滤床上，04固定好滤器，将250mL水样或稀释液通05过孔径0.45μm的滤膜过滤，然后将过滤06后的滤膜贴在已制备好的CN琼脂平板上，07平铺并避免在滤膜和培养基之间夹留着08气泡。091结果观察2培养20h～24h观察滤膜上菌落的生长3情况并计数，防止因为培养导致菌落过分4生长而出现菌落融合。（40h～48h时更5容易观察产色素情况和荧光情况）。STEP4STEP3STEP2STEP1?计数所有显蓝色或绿色（绿脓色素）的菌落，初步判定为铜绿假单胞菌。?计数滤膜上所有发荧光不产绿脓色素疑似铜绿假单胞菌菌落，并进行乙酰胺肉汤确定试验。（在紫外线下检查滤膜时，应避免长时间在紫外光下照射，否则可能会将平板上的菌落杀灭，而导致无法在证实培养基上生长。）?将其它所有红褐色不发荧光的菌落进行氧化酶试验、乙酰胺肉汤、金氏B培养基确证实验。可疑菌落计数情况单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。您的内容已经简明扼要，字字珠玑，但信息却千丝万缕、错综复杂，需要用更多的文字来表述；但请您尽可能提炼思想的精髓，否则容易造成观者的阅读压力，适得其反。正如我们都希望改变世界，希望给别人带去光明，但更多时候我们只需要播下一颗种子，自然有微风吹拂，雨露滋养。恰如其分地表达观点，往往事半功倍。当您的内容到达这个限度时，或许已经不纯粹作用于演示，极大可能运用于阅读领域；无论是传播观点、知识分享还是汇报工作，内容的详尽固然重要，但请一定注意信息框架的清晰，这样才能使内容层次分明，页面简洁易读。如果您的内容确实非常重要又难以精简，也请使用分段处理，对内容进行简单的梳理和提炼，这样会使逻辑框架相对清晰。为了能让您有更直观的字数感受，并进一步方便使用，我们设置了文本的最大限度，当您输入的文字到这里时，已濒临页面容纳内容的上限，若还有更多内容，请酌情缩小字号，但我们不建议您的文本字号小于14磅，请您务必注意。单击此处添加正文，文字是您思想的提炼，为了演示发布的良好效果，请言简意赅地阐述您的观点。您的内容已经简明扼要，字字珠玑，但信息却千丝万缕、错综复杂，需要用更多的文字来表述；但请您尽可能提炼思想的精髓，否则容易造成观者的阅读压力，适得其反。正如我们都希望改变世界，希望给别人带去光明，但更多时候我们只需要播下一颗种子，自然有微风吹拂，雨露滋养。恰如其分地表达观点，往往事半功倍。当您的内容到达这个限度时，或许已经不纯粹作用于演示，极大可能运用于阅读领域；无论是传播观点、知识分享还是汇报工作，内容的详尽固然重要，但请一定注意信息框架的清晰，这样才能使内容层次分明，页面简洁易读。如果您的内容确实非常重要又难以精简，也请使用分段处理，对内容进行简单的梳理和提炼，这样会使逻辑框架相对清晰。为了能让您有更直观的字数感受，并进一步方便使用，我们设置了文本的最大限度，当您输入的文字到这里时，已濒临页面容纳内容的上限，若还有更多内容，请酌情缩小字号，但我们不建议您的文本字号小于14磅，请您务必注意。单击此处添加正文，纯化01?营养琼脂：将需验证的可疑菌落划线接02种营养琼脂培养基，于36℃±1℃培养0320h～24h，对可疑菌进行纯化。04铜绿假单胞菌一、概述铜绿假单胞菌（P.aeruginosa）俗称绿脓杆菌，因为在代谢过程中产生水溶性的绿色色素，使伤口与创面呈绿色，故名绿脓杆菌。铜绿假单胞菌能在许多污染物质中存活并繁殖，生长营养需求不高，善于利用各种碳源和氨化合物作为氮源，在水、土壤、食品以及医院等环境广泛存在，甚至在蒸馏水、消毒液也不例外，如季铵类消毒液，特别是含有一些有机物的液体。铜绿假单胞菌可由多种途径传播，但主要是通过污染医疗器械、用具及带菌医护人员引起医源性感染，因此，对烧伤病房、手术器械及治疗器械应进行严格消毒灭菌，以保证无铜绿假单胞菌的污染。对铜绿假单胞菌感染的治疗，可应用庆大霉素、多粘菌素B和羧苄青霉素。铜绿假单胞菌抵抗力较其他革兰阴