细菌和噬菌体的遗传分析.ppt

差异：不同Hfr菌株转移的原点(O)和转移方向不同。进一步说明了F因子和细菌染色体都是环状。原始Hfr菌株（三）细菌的重组作图在中断杂交中，根据基因转移的先后次序，以时间为单位求出各基因间的距离，叫做时间作图法如果2个基因间的转移时间2min则用中断杂交作图不可靠，应采用传统的重组作图法。杂交Hfrlac+ade+×F-lac-ade-用链霉素基本培养基，可选出F-ade+的菌落●由于lac+ade-近，两者相继进入时间相距很短，难以准确界定，所以只能根据产物确定。●如果选出ade+同时也选出lac+，说明lac-ade间没有发生过交换；如果是lac-ade+说明发生交换。重组作图①Hfrlac+ade+F-lac-ade-不交换lac+ade+。②Hfrlac+ade+F-lac-ade-两基因之外双交换lac-ade-。③Hfrlac+ade+F-lac-ade-两基因间发生交换lac-ade+213将重组子影印在EMB（曙红+美蓝）培养基上，如果是紫红色，说明重组子含有lac+ade+。如果是粉红色，说明重组子含有lac-ade+。另一种筛选方式：01结论：02用时间单位法lac-ade的图距是一分钟，所以时间单位和重组值的关系大致是1分钟=20%的重组值。全长约100min，含4×106核苷酸对，所以总图距相当于2000cM，故1cM=2000bp。这种接合重组作图在短距离内是有效的。如相距2min以上的就有可能表现不连锁。同时这种接合重组不产生交互的重组类型，所以得出的图距和减数分裂生物中所确定的图距不同。E.Coli的染色体第三节F′因子与性导一、F′因子当F’因子再整合到细菌染色体时，它就只能在原来的地点配对、交换而插入其中，而不能象F因子那样可以在任何位点整合。F`菌株：指带有F`因子的细菌。1959年，Adelberg在E.coli中发现一种新的F因子。Hfr→F+因子的时候，F因子偶尔可能获得细菌染色体的一部分,它携带有大肠杆菌染色体的一些基因，这种F因子称为F′因子F’因子：F’因子携带染色体的节段大小：从一个标准基因到半个细菌染色体F′与λdgal或λdbio颗粒不同，F′携带细菌的基因，但不减少自身的基因，如果自身的基因丢失，转移就可能停止。（见下节）01F′不存在蛋白质外壳包装的问题，所以它的长度不为包装所限制，可以携带不同长度的细菌DNA片段。02F′×F-→F′03F′因子特点：性导是指接合时由F′因子所携带的外源DNA整合到细菌染色体的过程。F’因子转入受体细胞后，由于引入体细胞的部分基因，从而形成部分二倍体，这种利用F’因子将供体细胞的基因导入受体形成部分二倍体的过程叫性导（sexduction或F’---duction）二、性导这种部分二倍体如果不发生重组：F′因子自主复制。如果发生重组：①单交换：形成Hfr。双交换:形成F’品系。性导的结果：转化:从细菌的培养物提取的ＤＮＡ可以在体外转移到受体细菌中，这一过程称为转化（transformation）。A能接受外源DNA分子并被转化的细菌细胞称为感受态细胞（competencecell），即细胞处于能摄取核酸分子时的生理状态。而促进转化作用的酶或蛋白质分子称为感受态因子（competencefactor）。B第四节细菌的转化作图受体细菌细胞壁并非任何区域都允许外源DNA片段通过，而只是在特定区域形成临时性通道，因此将这一区域称为受体部位（receptorsite）,而在受体细胞表面这一部位的数目是有限的。外源DNA进入除受体部位允许通过外，还必须有酶或蛋白质分子以及能量等的协同作用。显然外源DNA只有在酶促旺盛的受体部位进入。转化频率低的原因可能有：转化的过程通过转化可以测定基因的连锁、基因的排列顺序以及图距。通过转化片段平均大小相关的共转化频率测定，就可以获得这些基因的连锁图谱。Nester等用枯草杆菌的一个菌株trp2+his2+tyr1+作为供体，提取其DNA向受体trp2-his2-tyr1-菌株进行转化，结果如下：321转化的应用：第五节噬菌体的遗传学分析噬菌