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染色技术
;微生物染色的染料;在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷；
而碱性染料在电离时，其分子的染色部分带正电荷；
带正电荷的碱性染料染色部分很容易与带负电荷细菌细胞结合使细菌染色。;革兰氏染色;革蓝氏阳性和阴性菌细胞壁成分比较;革兰氏染色的意义;微生物分类鉴定的特征;形态学特征;涂片;涂片;初染将玻片置于玻片搁架上，加草酸铵结晶紫染色液(加量以盖满菌膜为度)，染色1-2min。倾去染色液，用自来水小心地冲洗。
媒染滴加(Lugol)碘液，染1-2min，水洗。
脱色滴加95%乙醇，脱色20-25s立即水洗，以终止脱色。
复染滴加蕃红，染色2-3min，水洗。最后用吸水纸轻轻吸干。
干燥后，置油镜观察。被染成紫色者即为革兰氏阳性菌(G?)；被染成红色者是革兰氏阴性菌(G-)。
;一、实验目的;G－肽聚糖层较薄，交联度低，含较多脂质，故用乙醇等有机溶剂脱色时融解了类脂质，增加了细胞的通透性，使初染的结晶紫和碘的复合物易于渗出，经沙黄复染呈红色。
G＋细胞壁结构致密，用脱色剂处理后，肽聚糖层孔径缩小，通透性降低，故细菌仍保留初染时的紫色。;2、芽孢染色原理;三、实验材料;四、实验步骤;革兰氏染色法;方法一
1、制备菌液：加1-2滴蒸馏水于试管中，从斜面挑取2-3环的菌苔于试管中并充分打匀，制成浓稠的菌液。
2、加染色液：加5%孔雀绿2-3滴于试管中用接种环搅拌，使其充分混合。
3、加热：将此试管浸于沸水浴中，加热15-20分钟。
4、涂片：从试管底部挑菌液于洁净的玻片上，涂成薄膜，晾干。
5、固定：将涂片通过微火3次。
6、脱色：水洗，直到流出的水中无绿色为止。
7、复染：加番红染色2-3分钟后，倾去染色液，不用水洗，直接用吸水纸吸去余水，于酒精灯火焰上烘干。
8、镜检：用油镜观察绘图。;方法二
1、涂片、干燥及固定
2、加温染色：加5%孔雀绿染色液于玻片上，微火加热至冒蒸汽维持5分钟。
3、水洗将玻片冷却，水洗直到流出的水中无绿色为止。
4、常温复染：加番红染色2分钟后，倾去染色液，水洗，直接用吸水纸吸去余水。
8、镜检：用油镜观察绘图。;五、实验结果;GramStainofStaphylococcusaureus;芽孢染色结果;六、问题与讨论
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