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解析植物体细胞杂交过程包括原生质体的制备(去壁)、原生质体融合、再生细胞壁、植物组织培养等过程。图示过程①需要用纤维素酶和果胶酶处理去除细胞壁,酶处理的时间差异的原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异,A项正确;过程②可采用PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法、电融合法和离心法等诱导原生质体融合,不能用灭活的仙台病毒诱导,B项错误;过程④和⑤分别是脱分化和再分化,培养基中均需要加入生长素和细胞分裂素,C项正确;杂种植株细胞中同时含有植物甲和乙的染色体,可通过分析植物丙的染色体,来鉴定其是否为杂种植株,D项正确。6.(2024·江西卷改编)某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S(含有多个不同的抗原决定基,每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体)。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法,研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体(如图)。下列说法不正确的是()A.利用胶原蛋白酶处理,可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞B.制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是不同的单克隆抗体C.用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养,但不能冻存D.单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白答案C解析胶原蛋白酶可以催化分解细胞外的胶原蛋白,因此利用胶原蛋白酶处理,可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞,A项正确;由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基,每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体,单克隆抗体A和单克隆抗体B来自不同的杂交瘤细胞,因此制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是不同的单克隆抗体,B项正确;用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养,也可以冷冻保存,C项错误;单克隆抗体A和单克隆抗体B都来自筛选出的杂交瘤细胞,因此都能够特异性识别S蛋白,D项正确。【归纳拓展】比较植物体细胞杂交与动物细胞融合项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性过程项目植物体细胞杂交动物细胞融合相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶融合方法物理法:电融合法、离心法等;化学法:PEG融合法、高Ca2+—高pH融合法等PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等结果杂种植株杂交细胞【练模拟拓角度】7.(2024·北京昌平二模)我国科研人员在太空中进行细胞电融合实验,获得烟草黄花品种叶肉细胞与烟草革新一号叶肉细胞的杂交细胞,又成功完成小鼠淋巴细胞和人骨髓瘤细胞杂交实验。下列相关叙述不正确的是()A.两个电融合实验中,融合前都需用一定浓度的特定酶预处理实验材料B.细胞经电融合处理后,需进一步筛选,以淘汰未融合细胞和多核细胞C.电融合处理后的烟草细胞经组织培养,可获得具有双亲优良性状的植株D.经电融合获得的人—鼠杂交瘤细胞,培养过程中体现了细胞的全能性D解析因植物细胞外面的细胞壁阻碍了细胞间的杂交,因此在诱导两个品种烟草的叶肉细胞融合之前,先要用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞的细胞壁;动物细胞虽然没有细胞壁,但为了防止人骨髓瘤细胞在培养过程中出现贴壁生长,在诱导小鼠淋巴细胞和人骨髓瘤细胞电融合前,也需用一定浓度的特定酶预处理实验材料,A项正确。融合后的细胞最初是多核的,经过有丝分裂后,细胞核才能融合,细胞经电融合处理后,需进一步筛选,以淘汰未融合细胞和多核细胞,B项正确。电融合处理后的烟草细胞经组织培养,可获得完整的植株。由于该植株的遗传物质来自双亲,所以具有双亲的优良性状,C项正确。经电融合获得的人—鼠杂交瘤细胞,培养过程中体现了细胞膜的流动性,没有体现细胞的全能性,D项错误。8.(2024·重庆九龙坡模拟)图1为单克隆抗体的制备原理和方法,这样制得的抗体为鼠源性抗体,图2为鼠、人抗体基因示意图。下列叙述错误的是()图1图2A.图1获得的杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量增殖,又能产生特异性抗体B.细胞培养时除特殊营养成分外,还需提供95%空气和5%CO2的气体条件C.图1获得单克隆抗体过程中,需要进行克隆化培养和抗体检测D.将图2中的A和D连接进行基因改造可以降低鼠源抗体的免疫原性D解析杂交瘤细胞既具有B细胞的特点又具有骨髓瘤细胞的特点,即既能无限增殖又能产生特异性抗体,A项正确;动物细胞培养时除特殊营养成分外,还需提供95%空气和5%CO2的气体条件,B项正确;对细胞进行克隆化培养后通过抗原—抗体杂交技术进行抗体检测,才能确认是所需抗体,C项正确;为降低鼠源抗体的免疫原性,进行基因改造时,应该把图2中的C和B进行连接,D项错误。突破点3表达载体的构建及基因编辑技术聚焦1限制酶的选取与基因表达载体的构建【链真题明方向】1.(2023·湖北卷)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因
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