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第2课时微生物的选择培养和计数
1.下列关于大肠杆菌的培养的叙述不正确的是(????)
A.配制固体培养基所加的琼脂是从红藻中提取的脂类
B.在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行灭菌
C.用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要保证待测样品稀释的稀释度合适
D.使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃
【答案】A
【分析】微生物培养的关键是防止杂菌的污染,微生物培养过程中除考虑营养条件外,还要考虑pH、温度和渗透压等条件。微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,其中稀释涂布平板法不仅可以用来分离微生物,还可以用来统计样品中活菌的数目。
【详解】A、培养基根据其状态可分为固体培养基和液体培养基,其中制作固体培养基时,需要加入琼脂作为凝固剂,琼脂主要用海南的麒麟菜或石花菜制作出来的,其主要成分为膳食纤维和蛋白质,A错误;
B、获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌的污染,需对培养基和培养皿进行严格的灭菌处理,B正确;
C、用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要保证待测样品稀释的稀释度合适,为保证结果准确,一般选择30~300的平板进行计数,C正确;
D、使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止微生物对环境造成污染,D正确。
故选A。
2.为提高酿酒过程中淀粉糖化效率,研究人员从大曲中筛选高产淀粉酶的酵母菌株,实验步骤如下图,相关叙述正确的是()
A.步骤③的目的是确保有一个浓度对应步骤④的菌落数介于30~300个
B.步骤④后应根据酵母菌的形状、大小、边缘粗糙程度等挑取酵母菌
C.步骤⑤后应挑取菌落直径与透明圈直径比值最小的菌落
D.步骤⑥中摇床培养使酵母菌充分释放淀粉酶,提高步骤⑦的准确性
【答案】C
【分析】实验室中目的菌株的筛选
①原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物生长。
②从土壤中分离目的微生物的一般步骤是:土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。通过梯度稀释使聚集在一起的微生物分散成单个细菌,在培养基表面形成单个的菌落。
③培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌,富集培养可以使用液体培养基,选择培养基是指通过培养混合的微生物,仅得到或筛选出所需要的微生物,其他不需要的种类在这种培养基上是不能生存的。
【详解】A、图中步骤③是进行一系列梯度稀释的操作,通过梯度稀释使聚集在一起的微生物分散成单个细菌,在步骤④的培养基表面形成单个的菌落,A错误;
B、菌落具有种的特异性,因此,步骤④后应根据菌落的形状、大小、边缘粗糙程度等挑取菌落,B错误;
C、具有高产淀粉酶能力的酵母菌可以产生大量淀粉酶,将淀粉水解,进而在菌落周围形成较大的透明圈,步骤⑤中菌落直径与透明圈直径比值最小的菌落说明该菌体分解淀粉的能力强,为初筛菌种,C正确;
D、步骤⑥中进行摇床培养的目的是使酵母菌与培养液充分接触,同时也能增加溶氧,使酵母菌大量繁殖,进而可产生更多的淀粉酶,D错误。
故选C。
3.在牛、羊等反刍动物的瘤胃中生活着多种微生物,其中有能分解纤维素的微生物。某科研团队按照如图所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌,实验中需要甲、乙两种培养基,并在刚果红培养基平板上,筛选到有透明降解圈的菌落。下列叙述错误的是(????)
A.培养基表面均加入一层无菌的石蜡主要是为防止杂菌的污染
B.甲培养基中唯一的碳源是纤维素,则该培养基是选择培养基
C.过程②中用适宜浓度NaCl进行梯度稀释是为了保持细胞形态
D.图中降解圈的大小与纤维素酶活性有关,菌落①降解能力最强
【答案】A
【分析】刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但与纤维二糖和葡萄糖无法发生这种反应。在含有纤维素的培养基中添加刚果红,刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维素被纤维素分解菌分解后,复合物无法形成,培养基中就会出现以这些菌为中心的透明圈。
【详解】A、反刍动物的瘤胃中不含氧气,其中存在的纤维素分解菌适宜在无氧条件下生存和繁殖,因此培养基表面覆盖无菌的石蜡主要是为了保证培养的无氧环境,A错误;
B、为了筛选纤维素分解菌,需要以纤维素为唯一碳源,能够分解纤维素的微生物能够生存,不能分解纤维素的微生物因无法获得碳源而死亡,因此甲培养基中唯一的碳源是纤维素,该培养基是选择培养基,B正确。
C、过程②是进行梯度稀释的过程,由于不确定该纤维素分解菌是否具有细胞壁,因此在梯度稀释的过程中使用适宜浓度的NaCl可以防止细胞因过度吸水导致膨胀破裂,保持细胞形态,C正确;
D、纤维素分解菌能分解纤维素是因为其可以产生纤维素酶,纤维素酶的活性越高,对纤维素的分解效果越好,以这些菌为中心的透明圈的直径与菌落直径的比值越大,据图比较菌落①的降解能力最强,D正确。
故选A。
4.餐余垃
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