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微生物的实验室培养课件
目录contents微生物实验室培养基础细菌培养方法与技巧真菌培养方法与技巧病毒培养方法与技巧寄生虫和蠕虫实验室培养方法微生物实验室安全与管理
01微生物实验室培养基础
微生物是一类形体微小、结构简单、必须借助光学显微镜或电子显微镜才能看到的微小生物。微生物定义微生物包括细菌、真菌、病毒、原生动物和藻类等,按形态可分为球菌、杆菌、螺旋菌等。微生物分类微生物概述与分类
显微镜培养箱高压蒸汽灭菌器移液器实验室常用设备介于观察微生物形态和结构,常用的有光学显微镜和电子显微镜。提供恒定的温度和湿度,用于培养微生物。用于培养基、玻璃器皿等物品的灭菌。用于准确移取液体,保证实验的准确性。
培养基定义01培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。培养基类型02根据物理性质可分为液体培养基、固体培养基和半固体培养基;根据成分可分为天然培养基和合成培养基;根据用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基等。培养基选择03根据实验目的和微生物种类选择合适的培养基,如细菌常用牛肉膏蛋白胨培养基,真菌常用马铃薯葡萄糖培养基等。培养基类型及选择
无菌操作是指在无菌条件下进行实验操作,以防止微生物污染。无菌操作定义包括无菌室的建立、无菌器材的准备、无菌操作的基本步骤和注意事项等。如实验前需对无菌室进行紫外线消毒,实验过程中需保持无菌器材的清洁和干燥,避免交叉污染等。无菌操作技术要点无菌操作技术要点
02细菌培养方法与技巧
注射接种法用注射的方法将待接的微生物转接于活的生物体内,如人或其它动物中,常见的疫苗预防接种,就是用注射接种法转接,从而使机体获得免疫。平板划线法通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。斜面接种法主要用于移种纯菌,使其增殖后用于鉴定或保存菌种。液体培养基接种法多用于一些不易在固体培养基上生长的粘液状细菌的培养。细菌接种技术
包括迟缓期、对数期、稳定期和衰亡期。主要有营养物质、酸碱度、温度、气体环境、渗透压和抑制剂等。细菌生长曲线及影响因素影响细菌生长的因素细菌生长曲线
包括平板菌落计数法和滤膜法。总菌数测定法活菌计数法死菌计数法常用的有平板菌落计数法和比浊法。常用的有平板菌落计数法和涂片染色法。030201细菌计数方法
采用特殊的厌氧培养装置,营造厌氧环境进行培养。厌氧菌培养需氧菌培养微需氧菌培养营养要求特殊的细菌培养在普通大气环境下的培养装置中进行培养,或通过提高培养基的氧含量来满足其生长需求。采用微需氧培养装置,控制氧含量在较低水平进行培养。针对某些营养要求特殊的细菌,需要配制特殊的培养基,以满足其生长需求。特殊细菌培养策略
03真菌培养方法与技巧
将真菌孢子或菌丝体直接涂抹在培养基表面,适用于观察菌落形态和生长速度。表面接种法用接种针将真菌孢子或菌丝体穿刺到培养基内部,适用于研究真菌在培养基内的生长情况。穿刺接种法将真菌孢子或菌丝体与培养基混合后倾注到培养皿中,适用于大量培养真菌。倾注接种法真菌接种技术
真菌生长条件及影响因素不同真菌对温度的要求不同,一般分为低温、中温和高温真菌。真菌生长需要一定的湿度,过高或过低的湿度都会影响真菌的生长。部分真菌需要光照才能生长,而另一些真菌则对光照不敏感。真菌需要碳源、氮源、无机盐和生长因子等营养物质才能生长。温度湿度光照营养
通过观察真菌菌落形态、菌丝体结构、孢子形态等特征进行鉴定。形态学鉴定通过测定真菌的生理生化指标,如碳源利用、氮源利用、酶活性等进行鉴定。生理生化鉴定利用PCR技术、DNA测序技术等分子生物学方法对真菌进行鉴定。分子生物学鉴定真菌鉴定方法
选择合适的培养基选择既适合真菌生长又适合细菌生长的培养基,如LB培养基、YPD培养基等。添加抗生素在培养基中添加适量的抗生素,以抑制细菌的生长,同时不影响真菌的生长。但需要注意抗生素的种类和浓度,以免对真菌产生负面影响。利用选择性培养基设计选择性培养基,使其只适合真菌生长而不适合细菌生长,或者只适合细菌生长而不适合真菌生长。这样可以实现真菌和细菌的分离培养。调整培养条件根据真菌和细菌的生长条件,调整温度、湿度、光照等培养条件,使两者都能在最佳状态下生长。真菌与细菌共培养策略
04病毒培养方法与技巧
病毒接种技术接种前准备选择适当的细胞系和培养基,准备病毒株和接种工具。接种方法采用吸附、注射、转染等方式将病毒接种到敏感细胞上。接种后处理保持细胞培养条件,观察细胞病变效应(CPE),及时收获病毒。
病毒复制周期包括吸附、注入、脱壳、生物合成、组装和释放等步骤。影响因素细胞类型、培养基成分、温度、pH值、湿度等环境条件对病毒复制有重要影响。病毒复制周期及影响因素
03qPCR法采用实时荧光定量PCR技术检测病毒基因组拷贝数,从而推算
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