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对性别如无特殊要求,一般选择公畜,便于粪、尿的分开收集。1试验动物宜选用体重为30-65kg、3-5月龄的去势公猪,或选用体重1.5kg以上的肉用仔鸡或4-5月龄的蛋用小公鸡。2试验动物的头数,猪和羊每个处理组初选不应少于6头,最后选留以4-5头为宜;对家禽则至少应选用8-10羽。3鼠代谢笼不同种类动物消化试验期动物种类预试期天数正试期天数牛、绵羊、水牛10-1410-14育成牛(6-12m)66马7-108-10猪(成年)7-106-10育成猪(4-8m)65家兔7-107-10家禽4-64-5指示剂法的前提是假设稳定物质通过动物消化道时其绝对数量不变,而粪中某养分的含量比饲料中的含量有所减少,推算出该养分的消化率。根据指示剂的来源不同,可分为外源指示剂法和内源指示剂法。指示剂法(稳定物质法)外源指示剂法:三氧化二铬(Cr2O3)是常采用的外源指示剂,由于它在动物的胃肠道中不会被消化吸收,故可将其按比例(0.5%)均匀的混入待测饲料中喂给动物,然后根据它在饲料与粪中的比例,即可计算出待测饲料的养分消化率。养分消化率(%)=式中a——饲料中某养分含量(%)b——粪中相应养分含量(%)c——饲料中Cr2O3含量(%)d——粪中Cr2O3含量(%)acadbbacdc×100=100-100××内源指示剂法:常用的内源指示剂主要有2mol/L或4mol/L盐酸不溶灰分(AIA),它们是饲料中本身所固有的不能被消化吸收的成分。与外源指示剂法相比,操作更简便,结果更准确。12010203指示剂法的优点:与全收粪法相比,指示剂法操作过程简单易行,省人力和时间,且无需特殊设备。指示剂法的缺点:回收率低,准确性较差。Cr2O3回收率仅75%-80%,只适用于干物质、有机物、粗蛋白和能量等含量较高成分的消化率测定。粪样的采集量至少应达到总排粪量的35%,每天采粪样的次数多一些。对于不能单独用于饲喂动物的饲料,其消化率测定使用间接法。它需要经过两次消化试验。第一次测定基础日粮的营养物质消化率;第二次试验测定由50%~80%的基础饲粮和20%~50%待测饲料构成的新日粮的营养物质消化率。基本假定:基础日粮营养物质的消化率在两次试验中保持不变。营养物质的消化率具有可加性。间接法在以上基本假定成立的情况下,通过两次消化试验便可按如下公式计算出待测饲料营养物质消化率:待测饲料营养物质消化率(DF,%)=DB+(DT-DB)/f式中,DB和DT分别表示基础日粮与新日粮营养物质的消化率;f表示新日粮营养物质中待测饲料营养物质所占的比例。本法是在假定基础饲料营养物质消化率在两次测定中保持完全一致的条件下实现的,但实际上100%的不变是不可能的(饲料间的互作及其他条件的影响)。为了保证测定结果的相对准确,就应保持基础饲粮营养物质消化率的稳定。因此必须注意以下几个方面:基础饲粮应是营养平衡的配合饲料(应符合动物营养需要),且基础饲粮中含有约10%的待测饲料。两次试验所需的基础饲粮应一次配齐。123待测饲料在新日粮中替代基础饲粮的比例不宜太少,一般以20%~50%为宜。4目前国际上已普遍采用此法测定饲料蛋白质的瘤胃降解率。首先在试验动物的瘤胃背囊部位安置瘤胃瘘管,将一定量(约3-5g)的待测饲料样品装入一特制的尼龙袋中,然后将尼龙袋系于塑料软管上,并通过瘤胃瘘管置入瘤胃内的一定部位,连续培养12-48小时后取出,冲洗干净,烘干称重,与放入前的饲料蛋白质含量相比,差值即为饲料可降解蛋白量。尼龙袋法A优点是简单易行,重现性好,实验期短,便于大批样品的研究。B尼龙袋的通透性要好,网眼大小要恰当,样品要有一定细度,便于瘤胃液作用而充分发酵。离体消化试验法离体消化实验是指模拟消化道的环境,在体外(实验室内)进行饲料的消化。因常规消化实验和指示剂法都要耗费大量人力、物力和时间。尼龙袋法虽有不少优点,但也需要较多的试验动物且安装瘘管以及操作仍较麻烦。用安装瘘管的办法收取小肠液或瘤胃液,在试管中进行孵化。反刍动物离体消化实验一般分为两步,故名“两步法”。先是用瘤胃液消化,然后再用胃蛋白酶加盐酸进一步消化,洗净残渣,测其各种养分含量或能值。非反刍动物(猪)离体消化实验也是模拟消化道的消化生理过程,分为二步。第一步是用胃蛋白酶加盐酸溶液消化,然后用小肠液在PH7.0的条件下作进一步孵化。用此法测得的结果与全收粪法无显著差异。在用胃蛋白酶孵化前,先用pH5.8的KH2PO4·Na2HPO4·淀粉酶缓冲液处理,效果更理想。安装收取小肠液的瘘管位置,以离幽门1.5-
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