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酶工程基本原理.ppt

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酶催化机理实例—胰凝乳蛋白酶胰凝乳蛋白酶的电荷接力网形成四联体过度态中间物酶催化机理实例—胰凝乳蛋白酶

胰凝乳蛋白酶的催化过程A.酶与底物结合,形成米氏复合物(ES)酶催化机理实例—胰凝乳蛋白酶E.形成包括水分子的四联体过度中间物羰基产物形成,酶游离CH2.2酶催化反应的动力学(1.酶催化反应的初速度)酶催化反应模型SPd[s]d[p]V=───=───dtdt酶促反应进行时间/min产物生成量/微摩PK2.1Michaelis-Menten迅速平衡学说及Henri-Michaelis-Mentwen方程单底物酶促反应模型:?k1kpE+S────ES────E+P-k1迅速平衡学说对上述反应模型有两点假定:①酶与底物结合形成酶底物复合物的速度很快。②整个反应速度取决于酶底物复合物释放出游离酶和形成产物的反应速度。CH2.2酶催化反应的动力学(2.底物浓度对反应速度的影响)反应速度v=kp[ES].......................................................….(1)Ks=[E][S]/[ES](Ks是ES的分解常数).....…....(2)[ES]=[E][S]/Ks..........................................…......(3)如果我们设反应体系中酶的总浓度为[E0],当反应达到平衡以后,酶分子以下列两种形式存在:[E0]=[E]+[ES].....................……………..….....(4)将3式分别和1式4式加以整理便得:v=Kp[E][S]/Ks..........................………...........(5)[E0]=[E]+[E][S]/Ks................……...…...........(6)CH2.2酶催化反应的动力学(3.Henri-Michaelis-Mentwen方程)将5式除以6式得:Kp[E][S]/KsKp[S]/Ksv/[E0]=─────────=───────...........(7)[E]+[E][S]/Ks1+[S]/Ks将两边都乘以1/Kp[S]/Ksv/Kp[E0]=──────.............................(8)1+[S]/Ks∵v=Kp[ES]只有当[E0]全部转变成[ES]时,反应才能达到最大反应速度。∴Vm=Kp[E0]......................……….......(9)将9式和8式整理得:[S]/Ks[S]v/Vm=─────=──────....…………(10)1+[S]/KsKs+[S]

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