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01吸附剂的选择吸附剂按其化学结构可分为两大类：一类是有机吸附剂，如活性炭、球形炭化树脂、聚酰胺、纤维素、大孔树脂等；另一类是无机吸附剂，如白土、氧化铝、硅胶、硅藻土等。02吸附操作及设备搅拌罐内的吸附操作固定床吸附吸附分离原理及设备色谱分离原理色谱分离操作条件色谱分离设备色谱分离原理及设备ColumnChromatography实验室规模空柱装柱示范录像GelFiltration-sizeResinhasfixedsizeporeswhichallowmoleculessmallerthanagivensizetoenterSmallmoleculeswilltakelongertopassdownthecolumnthanlargeonesbecausetheytravelfurtherCanestimatemolecularweightbycomparisonwithastandardIonExchange-chargeMixtureofproteinsisappliedtothenegativelychargedcolumnresin–balancedbyNa+ions(red)-veandneutralproteinspassinthevoidvolume,+veproteinsstickExcessofNa+ionsisadded+veproteinsareeluted CouldhaveusedchangeinpHtoelutetheproteinsCATIONEXCHANGEAffinityChromatographyUsesspecificbindingpropertytoattachproteintocolumnIncreaseconcentrationofligandtoelutetheproteinExamples:antibodycolumns-monoclonalantibodyattachedtocolumnglutathionecolumn–bindsglutathione-S-transferaseontarget工业规模的色谱分离流程Nowthatweunderstandsomerelevantpropertiesofproteinsandionexchangers,wewilldiscusstheprinciplesofachromatographicionexchangeseparation.Asinallchromatographictechniques,thefirststepistheequilibrationofthestationaryphasetothedesiredstartconditions.TheequilibrationtimeorvolumemustbelargeenoughtoguaranteeaconsistentionicstrengthandpHthroughouttheionexchangecolumn.In-lineconductivityandpHmonitorshelptoquicklyqualifythesecolumnconditions.Whenequilibriumisreached,allstationaryphasechargedgroupsareassociatedwithexchangeablecounter-ions,suchaschlorideorsodium,asshowabovebythered(counterions)andyellow(stationaryphasechargedgroups)balls.Thesecondstepissampleapplicationandwash.Thegoalinthisstepistobindthetargetmolecule/sandwashoutallunboundmaterial.ThesamplebuffershouldhavethesamepHandionicstrengt
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