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野菊花总黄酮增强细胞自噬促进β淀粉样蛋白清除.pdfVIP

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野菊花总黄酮增强细胞自噬促进β淀粉样蛋白清除--第1页

野菊花总黄酮增强细胞自噬促进β淀粉样蛋白清除

杨小四;赵欢;曹威;张俊强;陈晓宇

【摘要】目的探讨野菊花总黄酮(totalflavonoidsofChrysanthemum,TFC)清

除β淀粉样蛋白的作用和分子机制.方法采用CCK-8法观察不同浓度TFC对SH-

SY5Y神经细胞株增殖的影响,ELISA法检测TFC对转染过表达淀粉样前体蛋白

(APP)和淀粉蛋白前β位分解酶1(BACE1)的CHO细胞培养上清液中Aβ水平的影

响,MDC染色检测TFC处理后的神经元内自噬小体的形成,Westernblot检测自噬

蛋白LC3表达水平.结果CCK-8法分析显示,TFC对SH-SY5Y神经元活力无明显影

响;ELISA检测显示,TFC处理使过表达APP和BACE1的CHO细胞培养上清液中

Aβ水平呈浓度依赖性降低;荧光倒置显微镜下观察和Westernblot检测发现,TFC

处理后SH-SY5Y细胞自噬增加,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ自噬标志物蛋白表达增强.结论TFC

可能通过增强细胞自噬而促进Aβ的清除,减少Aβ细胞毒性.%ObjectiveTo

exploretheroleandmolecularmechanismoftotalflavonoidsfrom

Chrysanthemum(TFC)intheclearanceofβ-amyloid(Aβ)

peptides.MethodsThecytotoxicityofTFCwasfirstevaluatedusingCCK-8

assayinSH-SY5Ycells.ItsimpactonAβpeptidesecretionwasthen

determinedinCHOcellsoverexpressingβ-amyloidpro-protein(APP)and

β-siteAPP-convertingenzymel(BACE1),wheretheAβlevelsincellculture

mediawasmeasuredbyELISA.InresponsetoTFCtreatmentinSH-SY5Y

cells,autophagywasinvestigated,includingMDCstainingof

autophagosomesandwesternblotdeterminationofautophagymarker

LightChain3(LC3).ResultsCCK-8assayresultssuggestedthatTFCwasnot

toxicupto50mg/LinSH-SY5Ycells.InresponsetoTFCtreatment,CHO

野菊花总黄酮增强细胞自噬促进β淀粉样蛋白清除--第1页

野菊花总黄酮增强细胞自噬促进β淀粉样蛋白清除--第2页

cellsshowedadoseindependentsignificantreductiononthesecretedAβ

levelsinthesupernatant.TheTFCactivatedautophagywassupportedby

increasedautophagosomecountsandLC3ⅡexpressioninTFCtreatment

group.ConclusionThemechanismthatTFCenhancesAβclearancemaybe

throughinducingautophagyanddecreasethetoxicity.

【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志

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