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药典三部(2015版)-通则-3604新生牛血清检测要求--第1页
药典三部(2015版)-通则-3604
新生牛血清检测要求
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药典三部(2015版)-通则-3604新生牛血清检测要求--第1页
药典三部(2015版)-通则-3604新生牛血清检测要求--第2页
3604新生牛血清检测要求
本品系从出生14小时内未进食的新生牛采血分离血清，经除菌
过滤后制成。牛血清生产过程中不得任意添加其他物质成分。新生牛
血清应进行以下检查，符合规定后方可使用。
如采用经过验证的病毒灭活工艺处理的牛血清，大肠杆菌噬菌体
及病毒检测必须在灭活前取样进行。
pH值应为7.00～8.50。
蛋白质含量采用双缩脲法（通则0731第三法）或其他适宜方
法测定，应为35～50g/L。
血红蛋白用分光光度法或其他适宜的方法测定，应不高于
200mg/L。
以蒸馏水为空白对照，使用1cm光路的比色杯，直接测定供试
品在576nm、623nm及700nm波长下的吸光度值，每个供试品至少
测定2次，计算平均测定值。按照下式计算供试品中血红蛋白含量：
血红蛋白含量（mg/L）=[(A×115)－(A×102)－(A×39.1)]10×
576623700
式中A、A、A为供试品在576nm、623nm及700nm波长下
576623700
的平均吸光度值。
渗透压摩尔浓度应为250～330mOsmol/kg（通则0632）。
细菌内毒素检查应不高于10EU/ml（通则1143凝胶限度试
验）。
支持细胞增殖检查用Sp2/0-Ag14或适宜的传代细胞进行。细
胞复苏后，用待测样品配制的培养液至少连续传三代后使用，取对数
药典三部(2015版)-通则-3604新生牛血清检测要求--第2页
药典三部(2015版)-通则-3604新生牛血清检测要求--第3页
生长期的细胞用于试验。
（1）细胞生长曲线的测定取供试品按10%浓度配制细胞培养
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液，按每1ml含10的细胞浓度接种细胞，每天计数活细胞，连续观
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察1周，并绘制生长曲线，细胞的最大增殖浓度应不低于10/ml。
（2）细胞倍增时间的测定按生长曲线计算细胞的倍增时间。
取细胞峰值前一天的细胞计数（Y）、接种细胞数（X）及生长时间（T）
计算。
倍增时间=T/AA=logY/X
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细胞的倍增时间应不超过20小时。
（3）克隆率的测定按有限稀释法将细胞稀释至每1ml含10
个活细胞的浓度，按每孔1个细胞接种于96孔细胞培养板，每板至
少接种60孔，于
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