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动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液去掉组织间蛋白10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养部分细胞遗传物质改变动物细胞培养不能最终培养成动物体随细胞增多,细胞就会停止分裂增殖1动物细胞培养植物组织培养和动物细胞培养的比较项目培养基结果应用植物组织培养动物细胞培养均需适宜的外界条件:PH,温度,营养及“无菌,无毒环境”固体,营养物质,蔗糖、植物激素培养成植株液体,营养物质,葡萄糖、动物血清培育成细胞系或细胞株(1)生产蛋白质制品
(如病毒疫苗、干扰素、
单克隆抗体、动物激素)(2)用于某些器官移植(1)试管苗的快速繁殖(2)无病毒植物的培育(3)生产药物等(4)人工种子(5)转基因植物的培育2、动物细胞融合细胞A细胞B杂种细胞物理法、化学法灭活的仙台病毒过程 诱导动物细胞融合与植物原生质体融合的原理和方法是否基本相同?制备单克隆抗体不具有繁殖性
但具有抗原性植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法(同左)生物:灭活的病毒物理(离心、振荡、电刺激)化学(PEG)诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目五、单克隆抗体抗原动物体内刺激效应B抗体特点:产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏1、常规抗体制备:一个B淋巴细胞:只分泌一种特异性抗体2、单克隆抗体杂交瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞:能无限增殖融合单克隆抗体培养抗原注入小鼠体内已免疫的B淋巴细胞骨髓瘤细胞筛选出杂交瘤细胞筛选出能产生特异性抗体的细胞群体外培养体内培养从培养液中提取从小鼠腹水中提取单克隆抗体细胞融合动物细胞培养单克隆抗体的制备(特定的选择培养基)主要用于疾病的诊断、治疗和预防。若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。特点:与常规抗体相比,具有特异性强、灵敏度高、化学性质单一的优点。1单克隆抗体是指:2杂交瘤细胞产生的单一抗体3单克隆抗体的应用多莉羊的培育过程卵细胞A母绵羊B母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠融合后的卵细胞核移植动物细胞核有全能性例.(06江苏)下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。(1)_______________技术是单克隆抗体技术的基础。(2)根据培养基的用途分类,图中HAT培养基属于________培养基。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比,最大的优越性是________________。(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外,还可以采用________________。(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_______________特点,又具备淋巴细胞的_______________特点。(6)淋巴细胞是由动物体_________中的______________细胞分化、发育而来。(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是____________。动物细胞培养选择特异性强,灵敏度高灭活的病毒在体外大量增殖分泌特异性抗体骨髓造血干细胞主动运输1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是()A.都需用CO2培养箱B.都须用液体培养基C.都要在无菌条件下进行D.都可体现细胞的全能性2.下列关于基因工程的叙述,错误的是()A.目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B.限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶C.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性D.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达CD胚胎工程的复习专题三胚胎工程操作对象:技术手段:理论基础:早期胚胎和配子胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细胞培养等哺乳动物的受精卵和早期胚胎的发育规律一、体内受精和早期胚胎的发育”精子的发生发生场所:睾丸时间:初情期——生殖机能衰退精原细胞有丝分裂次级精母细胞精子细胞精子MⅠ第一阶段第二阶段第三阶段MⅡ精子发生的过程多个精原细胞染色体复制变形初级精母细胞
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