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抗肿瘤药物药效学指导原则

一、基本原则

1.抗肿瘤药物分类

(1)细胞毒类药物(cytotoxicagent)：包括干扰核酸和蛋白质合成、抑制拓扑

异构酶及作用于微管系统的药物等；

(2)生物反应调节剂(biologicalresponsemodifier)；

(3)肿瘤耐药逆转剂(resistancereversalagent)；

(4)肿瘤治疗增敏剂(oncotherapysensitizer)；

(5)肿瘤血管生成抑制剂(tumorangiogenesisinhibitor)；

(6)分化诱导剂(differentiationinducingagent)；

(7)生长因子抑制剂(growthfactorinhibitor)；

(8)反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide)。

2.抗肿瘤药物药效学需研究内容

2.1包括体外抗肿瘤试验，体内抗肿瘤试验。

2.2评价药物的抗癌活性时，以体内试验结果为主，同时参考体外试验结果以

做出正确的结论。

2.3I类抗肿瘤新药应进行药物作用机制初步研究。

二、体外抗肿瘤活性试验

1.试验目的

1.1对候选化合物进行初步筛选；

1.2了解候选化合物的抗瘤谱；

1.3为随后进行的体内抗肿瘤试验提供参考，如剂量范围、肿瘤类别等。

2.试验方法

选用10-15株人癌细胞株，根据试验目的选择相应细胞系及适量的细胞接种浓

度，按常规细胞培养法进行培养；推荐使用四氮唑盐MTT还原法、XTT还原法、

磺酰罗丹明B染色法、或51Cr释放试验、集落形成法等测定药物的抗癌作用。

药物与细胞共培养时间一般为48-72小时，贴壁细胞需先贴壁24小时后再给

药。试验应设阳性及阴性对照组，阳性对照用一定浓度的标准抗肿瘤药，阴性对

照为溶媒对照。

3.评价标准

以同一样品不同浓度对肿瘤细胞抑制率作图可得到剂量效应曲线，然后采用

Logit法计算半数有效浓度(IC50值或EC50值)。体外试验至少重复一次。

附注：评价药物抗癌活性的方法：

1.MTT还原法

1.1基本原理：

四氮唑[MTT,3-(4,5-dimethylibiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolium

bromide]是一种能接受氢原子的染料。活细胞线粒体中与NADP相关的脱氢酶

在细胞内可将黄色的MTT转化成不溶性的蓝紫色的甲[月替](formazan)，而

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死的细胞则无此功能。用二甲基亚讽(DMSO)溶解甲[月替]后，在一定波长下用

酶标仪测定光密度值，即可定量测出细胞的存活率。

1.2操作步骤:

1.2.1选用对数生长期的贴壁肿瘤细胞，用胰酶消化后，用含10％小牛血清的

RPMIl640培养基配成5000个／ml的细胞悬液，接种在96孔培养板中，每

孔接种200μl，37℃，5％CO2培养24h。

1.2.2实验组换新的含不同浓度被测样品的培养基，对照组则换含等体积溶剂

的培养基，每组设3～5平行孔，37℃，5％CO2培养4～5d。

1.2.3弃去上清液，每孔加入200μl新鲜配制的含0.2mg／mlMTT的无血

清培养基．37℃继续培养4h