食品安全国家标准4789标准修订(参与修订者讲解).ppt

血清学鉴定血清学分型为选择性试验项目常见沙门氏菌抗原表中“__”是指溶原状态下O因子可以并存，和平共处，如6,7–6,7,14；“{}”是指O因子不相容，有你没我，如O:3,{10},{15},{15,34}；“[]”是指O或H因子有存在或不存在的可能性，如甲副H抗原为a，[1,5];“()”是指O或H因子弱凝集，但多价凝集较好。注意血清的质量。序号标准号标准名称1GB4789.1食品微生物学检验总则2GB4789.2食品微生物学检验菌落总数测定3GB4789.3食品微生物学检验大肠菌群计数4GB4789.4食品微生物学检验沙门氏菌检验5GB4789.106GB4789.15食品微生物学检验霉菌和酵母计数7GB4789.18食品微生物学检验乳与乳制品检验8GB4789.30食品微生物学检验单核细胞增生李斯特菌检验9GB4789.35食品微生物学检验食品中乳酸菌检验10GB4789.40食品微生物学检验阪崎肠杆菌检验与计数食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验本标准代替GB/T4789.10-2008《食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》和GB/T4789.37-2008《食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌计数》。第一法适用于食品中金黄色葡萄球菌的定性检验；第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数；第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食品中金黄色葡萄球菌的计数。标准适用范围的改变“称取25g样品至盛有225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤的无菌均质杯内……固体和半固体样品：称取25g样品至盛有225mL磷酸盐缓冲稀释液或生理盐水的无菌均质杯内……样品不再进行稀释，直接进行增菌培养提示：原标准中样品10倍稀释后，取5mL增菌，报告25g（mL）检出或未检出存在矛盾。污染严重时在10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤内呈混浊生长。第一法“5.1样品的处理”的修改第一法“5.3鉴定”的修改将染色镜检从“增菌和分离培养”移分离出来，与血浆凝固酶试验组成鉴定步骤，使标准更加具有逻辑性和统一性。第二法“8.4典型菌落计数和确认”的修改8.4.2选择有典型的金黄色葡萄球菌菌落的平板，且同一稀释度3个平板所有菌落数合计在20CFU～200CFU之间的平板，计数典型菌落数。如果：如果只有一个稀释度平板的菌落数在20CFU～200CFU之间且有典型菌落，计数该稀释度平板上的典型菌落；……增加的内容：第二法“9.结果计算”的修改第一法金黄色葡萄球菌检验程序1Baird-Parker琼脂：培养基中含有卵黄亚碲酸钾，能抑制大多数细菌的繁殖，并能促进金黄色葡萄球菌的生长使其产生黑色和晕圈。培养基中的丙酮酸钠和甘氨酸也能促进金黄色葡萄球菌的生长。2菌落形态：圆形、光滑凸起、湿润，直径约2~3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油或树胶的硬度，偶而可见无混浊带和透明圈的非典型菌落。3长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。分离培养基血琼脂：是一种基础培养基，含有5%的脱纤维血(羊血或兔血)。用于观察金黄色葡萄球菌的溶血现象。金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上呈β溶血。01菌落形态：呈金黄色，有时也呈白色，大而突起，圆形、不透明、表面光滑，周围有透明的β溶血环。02分离培养基试验原理：致病性的金黄色葡萄球菌产生的血浆凝固酶，使血浆中纤维蛋白原转变为纤蛋白，附着于细菌表面，产生凝固。金黄色葡萄球菌可产生两种凝固酶：一种是与细胞壁结合的凝固酶，为结合凝固酶；另一种是菌细胞释放于培养基中，为游离凝固酶。二者的抗原性不同。提示：血浆凝固酶试验是致病性金黄色葡萄球菌的重要鉴定方法。血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验加入新鲜配置兔血浆后，每半小时观察一次，观察6h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。也可用商品化的试剂，按说明书操作，进行血浆凝固酶试验。结果如可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落，重复试验。提示：兔血浆新鲜要配制。BP至营养琼脂/BHI，36℃培养18-24h兔血浆(0.5mL)+BHI培养物(0.2-0.3mL)36℃±