遗传物质的改变(二).pptVIP

营养缺陷型突变的检出与鉴定011945年，美国遗传学家Beadle和生物化学家Tatium研究出检测链孢霉营养缺陷型突变的方法。02基本根据：野生型菌株能合成一系列化合物--基本培养基上生长；缺陷型菌株不能在基本培养基上生长;能在完全培养基上生长;能在基本培养基＋它所不能合成的物质－-生长。（图）03二、链孢霉营养缺陷型突变的检出二、链孢霉营养缺陷型突变的检出这样依次分析下去，就可知道是哪种AA或哪种维生素不能合成。为了进一步确定发生的变异是由那一个基因控制的，还要将经过上述方法检出的突变型，跟不同交配型的野生型交配。看产生的子囊孢子的发育，表现出来什么样的分离现象，如果表现为1：1的分离，即4个是野生型，4个是突变型，那就表明是一个基因突变。家系分析（pedigreeanalysis）和出生调查常染色体隐性突变难以检出。很可能是由于两个杂合个体的婚配，而不是由于隐性突变。显性突变的起源比较容易检出。在人类方面，突变率的估计方法之一是根据家系中有显性性状的患儿的出现。在这些家系中，祖先各代是没有这些性状的；如双亲一方也有同一遗传病，则这名患儿应除去不计。四、人的突变的检出四、人的突变的检出例如：软骨发育不全（achondroplasia）由常染色体显性基因引起，患者四肢粗短。MΦrch(1941)调查，在94075活产儿中，发现10例为本病患者，其中2例的一方亲本也是本病患者，所以应该除去不计，其余8例的双亲正常，可以认为是新突变的结果。则每个基因的突变率是（10－2）/2（94072－2）＝4.2×10-5四、人的突变的检出下面是一个上眼睑下垂的家系，先证者的父母表型正常，说明是新产生的突变。目前用的较多的检出人类突变的另一方法，是筛选各种蛋白质或酶的微小变异：正常为HbAHbA血红蛋白（A）（?A?A)A与S两种血红蛋白电泳的迁移率不同，通过电泳可以分辩杂合体HbsHbA具两种血红蛋白的A和S(?A?S)例如：镰型细胞贫血症患者基因型HbsHbs血红蛋白（S）(?S?S)四、人的突变的检出四、人的突变的检出1现已知Hbs是β6Glu→val2该方法的局限是并不是所有氨基酸的代换都能引起蛋白质分子电荷的变化，因此，不是所有氨基酸的改变都能用电泳检出。3分子水平：RFLP、AFLP等、基因组序列分析等。四、人的突变的检出第五节突变的修复（repair）原核生物和真核生物在进化中都发展了各种修复系统（repairsystems）来修复DNA损伤。一、直接修复1.DNApolymerase修复DNApol都有3’?5’外切酶活性，对复制过程中的错误碱基掺入进行校正（proofreading）。动画演示DNA修复2.光修复（photoreactivationrepair）光复活酶（photoreactivationenzyme,PRE）4修复机理5是对UV诱发的T-T二聚体。修复发生在320-370nm的蓝光中。11949年AlbertKelner发现的。2修复酶：3PRE被光子激活，直接切断T-T之间的交联键。6（3）修复过程UV2AP（iminoform）C用于AIDS（acquiredimmunodeficiencysyndrome）病治疗的AZT（azidothymidine，叠氮胸苷）就是T的类似物，而且是反转录酶的底物（但不是复制酶的合适底物）。3.烷化剂（alkylatingagents）可将烷基团加到核苷酸上。（1）甲基磺酸乙酯（ethylmethanesulfonate，EMS）能给酮式G的第6位、T的第4位上加上甲基。G甲基化后与T配对。4.吖啶染料（acridinedyes）在DNA链中加入或除去一对碱基，造成移码突变（frameshiftmutation）。（1）二氨基吖啶（原黄素）（proflavin）扁平分子，能嵌入碱基对之间，引起DNA双螺旋扭曲，复制时导致缺失或插入。CGGCCGGCCGGNCCNGGNC5.脱嘌呤位点（apurinicsite）是指嘌呤环的9位N与脱氧核糖的1’位C之间的糖苷键（glycosidicbond）断裂形成的位点。又称APsite:丢失一个嘧啶后的位点也称为APsite（脱嘧啶位点：apyrimidinicsite）。引起的后果：导致碱基丢失。CGGTCCAGGTCCGGC6.脱氨基（deamination）（1）亚硝酸的作用（nitrousacid，NA）C或A被脱掉氨基后分别变成U或H（