紫外可见分光光度法.pptVIP

反应条件的选择**

1.显色反应2.对显色反应的要求*灵敏度高:一般ε104。*选择性好：显色剂仅与被测离子发生显色反应。*对照性好：显色剂在测定波长处无明显吸收,?λmax60nm。*反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。*显色条件易于控制，重现性好。显色反应条件的选择**1.显色剂用量吸光度A与显色剂用量CR的关系会出现如图所示的几种情况。选择曲线变化平坦处。2.反应体系的酸度在相同实验条件下，分别测定不同pH值条件下显色溶液的吸光度。选择曲线中吸光度较大且恒定的平坦区所对应的pH范围。3.显色时间与温度实验确定。4.溶剂一般尽量采用水相测定。吸光度与pH的关系曲线参比溶液的选择一般有一下几种情况：5.选择适当的参比溶液**STEP1STEP2STEP3STEP4溶剂参比若仅待测组分与显色剂的反应产物在测定波长处有吸收，而被测试液、显色剂及其他试剂均无吸收，则可用纯溶剂作参比溶液。试剂参比若显色剂或其他试剂在测定波长处略有吸收，而试液本身无吸收，则可用“试剂空白”（不加被测试样的试剂溶液）作参比溶液。试液参比若待测试液本身在测定波长处有吸收，而显色剂等无吸收，可用“试样空白”（不加显色剂的被测试液）作参比溶液。其它参比若显色剂、试液中其他组分在测定波长处有吸收，则可在试液中加入适当掩蔽剂将待测组分掩蔽后再加显色剂作为参比溶液。**紫外可见分光光度法概述**基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称吸光光度法，它包括比色法和分光光度法。01紫外-可见分光光度法是研究物质在紫外、可见光区的分子吸收光谱的分析方法。它属于分子光谱法的一种，是利用某些物质的分子吸收200～800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。01这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，广泛用于无机和有机物质的定性、定量测定。01**当一束太阳光照射某一溶液时，太阳光中某一颜色的光被吸收，其互补色光透过溶液，刺激人的眼睛，使人感觉到它的颜色。溶液颜色与光吸收的关系可见光波长及其互补光实例：1)高锰酸钾吸收绿光显紫红色；2)重铬酸钾吸收蓝光显黄色；3)邻菲罗啉铁溶液吸收蓝绿光显红色。完全吸收完全透过吸收黄色光光谱示意表观现象示意复合光根据溶液的颜色，可以估计该溶液吸收的光的波长。?/nm颜色互补色400-450紫黄绿450-480蓝黄480-490绿蓝橙490-500蓝绿红500-560绿红紫560-580黄绿紫580-610黄蓝610-650橙绿蓝650-760红蓝绿分光光度法的发展过程**分光光度法在发展过程中先后经过了目视比色法，光电比色法和分光光度法三个阶段。（1）目视比色法是一种用眼睛辨别颜色深浅，以确定待测组分含量的方法。（2）光电比色法是使用光电比色计测量溶液吸光度并计算待测组分含量。（3）分光光度法是应用分光光度计，通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度，对该物质进行定性、定量分析的方法。它包括紫外分光光度法、可见光分光光度法、红外分光光度法等。吸收曲线及常用术语**测量每一波长下有色溶液对光的吸收程度(即吸光度A)，然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得到一条曲线，称为吸收光谱曲线(简称吸收曲线)。吸收光谱示意图朗伯—比耳定律**透过光的强度It与入射光的强度I0之比称为透光度，用T表示。常用百分数表示：T=It/I0为了表示物质对光的吸收程度，常采用吸光度A这一概念，即透光度倒数的对数值。A=lg（I0/It）=lg（1/T）=－lgT1.透光度T和吸光度A布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。A∝c2.朗伯—比耳定律01A=εbc朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。二者的结合称为朗伯—比耳定律，其数学表达式为：02A=εbc式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度；b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；c：溶