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第8章细菌感染的
检查方法与防治原则病原菌检测:形态、分离与鉴定病原菌抗原的检测其他检测法:PCR等病原菌检测:检测病原菌及其抗原、代谢产物或核酸血清学诊断:检测患者血清中特异性抗体第一节细菌感染的诊断标本的采集和送检原则无菌操作早期采集做好标记尽快送检一、病原菌检测(一)标本的采集与运送适当标本细菌分离培养与鉴定细菌培养接种于适当培养基,根据菌落特征作初步鉴别。形态学检查不染色标本检查法压滴法、悬滴法,用暗视野显微镜或相差显微镜检查染色标本检查法革兰染色法、单染色法、抗酸染色法、特殊染色法生化试验现已有多种微量、快速的生化反应试剂盒以及半自动或全自动检测仪器应用于临床。01血清血鉴定已知Ab(多价、单价诊断血清)查未知Ag,常作玻片凝集试验,确定细菌的种、型。02动物试验分离、鉴定致病菌,测定某些细菌的毒力;常用小鼠、豚鼠、家兔等。03药物敏感试验对指导临床选择用药,及时控制感染具有重要意义。04药物敏感试验标本培养特征血清学鉴定生化试验动物试验形态特征培养基致病菌的分离和鉴定(三)病原菌抗原的检测优点:不受抗生素使用的限制敏感性高1、酶免疫技术(EIA)酶联免疫吸附法、酶标免疫组化法2、协同凝集试验3、免疫荧光技术(IF)荧光菌球法4、对流免疫电泳(CIE)5、免疫印记技术PCR技术病原菌核酸的检测不同的细菌具有不同的基因结构,通过测定细菌的特异性基因序列进行比较和鉴定。核酸杂交技术基因芯片(geneclips)技术PCR原理用已知Ag检测患者血清中未知Ab及其效价的变化,可作为感染性疾病的辅助诊断。双份血清恢复期或一周后血清抗体效价比早期升高4倍以上(含4倍),可确诊。种类直接凝集试验(肥达试验)补体结合试验、中和试验乳胶凝集试验、ELISA二、血清学诊断第二节细菌感染的特异性预防人工主动免疫artificialactiveimmunization疫苗(vaccine)类毒素人工被动免疫artificialpassiveimmunization抗毒素抗菌血清丙种球蛋白其他免疫制剂人工免疫人工主动免疫将疫苗及类毒素(抗原)接种于人体,使机体主动产生获得性免疫力。主要用于预防。疫苗第一代疫苗:死疫苗、活疫苗第二代疫苗:亚单位疫苗、基因工程疫苗第三代疫苗:DNA疫苗(核酸疫苗)死疫苗:伤寒、霍乱、流脑、钩体病等死疫苗。活疫苗:BCG、鼠疫、炭疽、脊髓灰质炎、麻疹等减毒活疫苗。两种疫苗优、缺点比较活疫苗接种次数1次接种剂量小接种反应轻/隐性感染免疫类型体液、细胞免疫时间持久稳定性差毒力回复有可能安全性免疫缺陷者危险死疫苗2-3次大明显体液短暂 强无好亚单位疫苗(subunitvaccine)利用微生物的保护性抗原制成的不含有核酸、能诱发机体产生免疫应答的疫苗。如肺炎球菌、脑膜炎球菌荚膜多糖疫苗。基因工程疫苗利用基因工程技术把编码病原体保护性抗原表位的目的基因,导入原核或真核表达系统后,用表达的保护性抗原所制成的疫苗。核酸疫苗(nucleicacidvaccine)也称DNA疫苗,将编码保护性抗原的基因重组到质粒真核表达载体上,然后将重组的质粒DNA直接注射到宿主体内,外源基因在体内表达的抗原刺激机体的免疫应答。类毒素是用细菌的外毒素经0.3%~0.4%甲醛处理后,其毒性消失但保留免疫原性。如白喉、破伤风类毒素。12
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