细菌形态结构观察.pptVIP

实验二细菌形态和结构观察（Ⅰ）（细菌的简单染色和革兰氏染色）观察细菌菌落征。掌握细菌简单染色、革兰氏染色技术。在油镜下观察细菌个体形态。实验目的二、实验原理1、细菌菌落特征2、细菌基本形态3、细菌革兰氏染色机理共有特征：湿润，较光滑，较透明，较粘稠，易挑取，质地均匀，颜色多样，菌落正反面及边缘与中央颜色一致。特有特征：有鞭毛：菌落大而平坦，边缘多缺刻、不规则有糖被：菌落大，透明，呈蛋清状有芽孢：菌落外观粗糙，“干燥”，不透明且表面多褶基本形态：球状，杆状，螺旋状。其它形态：星形，方形，带柄状，畸形，衰退形G＋：细胞壁厚，内肽聚糖含量高，且交联度大，网孔小，不含脂类。G－：细胞壁薄，内肽聚糖含量低，交联度小，网孔大，脂类含量高。革兰氏染色过程：初染→媒染→脱色→复染。三、实验材料1、菌种：大肠杆菌（Escherichiacoli）、枯草芽孢杆菌（B.subtilis）、金黄色葡萄球菌（S.aureus）（培养18~24h的菌落平板各一个）。2、染液（1）简单染色：吕氏美蓝染液或齐氏石炭酸复红染液。（2）革兰氏染液：草酸铵结晶紫染液、革兰氏碘液、95%乙醇、番红染液。3、其他物品：普通光学显微镜、载玻片、接种环、镊子、酒精灯、无菌水、吸水纸、香柏油、香柏油、二甲苯、擦镜纸。四、实验步骤1、菌落形态观察：2、细菌简单染色：3、细菌革兰氏染色。注意：菌落颜色、湿度、形状、大小、透明度、颜色、边缘是否规则等特征。染色过程：涂片→干燥→固定→染色（1min）→水洗→干燥→镜检注意事项：涂片：取菌量不能太大干燥：自然干燥水洗：水流不能直接冲在涂菌处滴加少量水挑取菌体涂片干燥固定染色水洗干燥细菌革兰氏染色过程涂片→干燥→固定→初染（草酸铵结晶紫染色1min）→水洗→媒染（碘液冲洗后覆盖1min）→水洗→脱色（95％乙醇脱色至流下乙醇无色为止）→立即用水冲洗→复染（番红染色2～3min）→水洗→干燥→镜检染色结果金黄色葡萄球菌革兰氏染色结果染色结果大肠杆菌革兰氏染色结果染色结果金黄色葡萄球菌和大肠杆菌混合菌样的革兰氏染色结果染色结果枯草芽孢杆菌革兰氏染色结果