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高效液相色谱测定乳制品中黄曲霉毒素M1

一、1.引言

(1)黄曲霉毒素M1（AflatoxinM1，AFM1）是一种强烈的致癌物质，主要污染动物饲料和乳制品。根据世界卫生组织（WHO）和国际癌症研究机构（IARC）的数据，黄曲霉毒素是已知最强的致癌物之一，长期摄入可能导致肝癌等严重疾病。近年来，随着人们生活水平的提高和食品安全意识的增强，对乳制品中黄曲霉毒素M1的检测要求日益严格。据统计，全球每年约有12%的饲料被黄曲霉毒素污染，而乳制品作为人类重要的营养来源，其安全性直接影响着公众健康。

(2)在我国，食品安全法律法规对乳制品中黄曲霉毒素M1的含量有明确的规定。例如，《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》规定，乳制品中黄曲霉毒素M1的限量标准为0.5μg/kg。这一标准的设定，旨在保护消费者健康，防止因黄曲霉毒素M1的摄入而导致的健康风险。然而，由于乳制品生产、储存和运输等环节的复杂性，黄曲霉毒素M1的污染问题依然存在。据不完全统计，我国每年有数百起乳制品黄曲霉毒素M1超标事件发生，严重影响消费者信心和乳制品行业的健康发展。

(3)为了有效控制乳制品中黄曲霉毒素M1的污染，提高检测技术的准确性，高效液相色谱法（HPLC）因其灵敏度高、特异性强、分离效果好等优点，已成为检测黄曲霉毒素M1的主要手段。近年来，随着色谱柱、检测器等技术的不断进步，HPLC检测黄曲霉毒素M1的方法得到了广泛的应用。例如，2016年，我国某研究团队开发了一种基于HPLC-MS/MS的高灵敏度检测方法，对黄曲霉毒素M1的检测限达到了0.01μg/kg，显著提高了检测的准确性。这一研究成果为我国乳制品中黄曲霉毒素M1的检测提供了有力的技术支持。

二、2.乳制品中黄曲霉毒素M1的概述

(1)黄曲霉毒素M1（AFM1）是一种由黄曲霉和寄生曲霉产生的真菌毒素，主要污染谷物、油料作物和乳制品等食品。黄曲霉毒素M1的化学结构稳定，耐热性强，即使在高温加热或加工过程中也难以破坏。研究表明，黄曲霉毒素M1具有强烈的致癌性，特别是对肝脏的毒性，长期摄入可能导致肝癌等严重疾病。根据世界卫生组织（WHO）和国际癌症研究机构（IARC）的评估，黄曲霉毒素M1被归类为1类致癌物。

(2)乳制品是黄曲霉毒素M1的主要污染源之一。在奶牛的饲料中，如果存在被黄曲霉毒素污染的饲料，奶牛通过摄取这些饲料后，黄曲霉毒素M1会进入其体内，并积累在奶中。据统计，全球约有12%的饲料受到黄曲霉毒素的污染，其中黄曲霉毒素M1的比例较高。乳制品中的黄曲霉毒素M1污染不仅对消费者健康构成威胁，也严重影响了乳制品行业的信誉和可持续发展。因此，对乳制品中黄曲霉毒素M1的检测和控制成为食品安全监管的重要环节。

(3)乳制品中黄曲霉毒素M1的检测方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、酶联免疫吸附测定法（ELISA）和液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS）等。其中，HPLC因其灵敏度高、特异性强、分离效果好等优点，被广泛应用于黄曲霉毒素M1的检测。HPLC检测通常结合荧光检测器或二极管阵列检测器，能够实现低至0.1μg/kg的检测限。此外，随着LC-MS/MS技术的发展，该方法在黄曲霉毒素M1的检测中展现出更高的灵敏度和准确性，检测限可达到0.01μg/kg以下。在实际应用中，乳制品生产企业和监管机构应定期对产品进行黄曲霉毒素M1的检测，确保产品质量符合食品安全标准，保障消费者健康。

三、3.高效液相色谱法测定原理

(1)高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和分析技术，用于测定乳制品中的黄曲霉毒素M1。该方法基于物质在固定相和流动相之间的分配系数差异，通过高压泵将流动相（溶剂）推过含有固定相（色谱柱）的柱子，使不同成分根据其物理化学性质进行分离。在黄曲霉毒素M1的测定中，常用的流动相为乙腈或甲醇，检测限可达到0.01μg/kg。例如，某研究使用HPLC-FLD检测牛奶中的AFM1，检测限为0.05μg/kg，回收率在85%至95%之间。

(2)HPLC测定黄曲霉毒素M1时，样品通常需要经过提取和净化处理。提取方法包括溶剂萃取、固相萃取等，目的是将黄曲霉毒素M1从复杂的样品基质中分离出来。净化步骤如柱层析、吸附剂净化等，用于去除干扰物质，提高检测的准确性。例如，某实验室采用乙腈和正己烷混合溶剂提取牛奶中的AFM1，然后用C18固相小柱净化，净化效率达到95%以上。

(3)在HPLC测定黄曲霉毒素M1的过程中，检测器通常选用荧光检测器（FLD）或二极管阵列检测器（DAD）。FLD对黄曲霉毒素M1具有高灵敏度，检测限可达0.01μg/kg，而DAD则能提供更全面的波长扫描信息，有助于提高定量分析的准确性。在实际应用中，例如某品牌乳制品在HPLC检测中，采用FLD