药品微生物检验特点及过程控制.ppt

中国药品生物制品检定所一靠经验二靠实验123三靠严格程序控制避免干扰浑不浑浊?物理变化、化学变化还是生物变化？41、长菌与否？中国药品生物制品检定所01液体培养基浑浊物理变化？化学变化？生物学变化？02平板上的菌落琼脂表面、琼脂中、琼脂和平皿夹层菌落or药渣？03是不是微生物？经60Coγ射线大剂量照射再检验延长培养时间到7天重新划线培养镜检中国药品生物制品检定所0201菌落or药渣？中国药品生物制品检定所分离鉴定立即转接2ml该培养物至相同的培养基中继续培养；取5支冻存管，每管分装1ml浑浊培养物，-80℃保存；取浑浊培养物在TSA平板/血琼脂上划线，分离污染微生物；如果发现硫乙醇酸盐流体培养管变浑浊，还应增加血平板划线，并在厌氧条件下培养分离厌氧菌。由平板分离到的菌落应进一步鉴定，并逐一保藏。中国药品生物制品检定所宏观：生长形态微观：镜检鉴定：生化鉴定（API、BD）核酸鉴定（16sRNA、DNA）……是什么微生物？3、溯源调查中国药品生物制品检定所样品阳性培养物分离菌株检验过程监控菌株环境菌（近期、远期）现场调查收集菌株鉴定与相似性分析相结合传统方法与新技术相结合不同方法的交叉验证中国药品生物制品检定所01相似性分析同源性分析脉冲场电泳（PFGE）、傅立叶红外（FTIR）02微生物来自哪里？中国药品生物制品检定所SamplePreparationSuspendingHarvestingLoading图不同来源的阴沟肠杆菌红外图谱聚类关系FT-IRSpektrumofmicroorganismsAutomatedmeasurementafterdryingofthesamples!中国药品生物制品检定所中国药品生物制品检定所**药品微生物检验特点

及过程控制中国药品生物制品检定所马仕洪2010年5月26日上海website:e-mail:mash@tel:010地址：北京市天坛西里2号邮编：100050中国药品生物制品检定所药品微生物检验特点及过程控制药品因素环境影响培养观察抽样检查破坏试验方法验证过程控制无菌/微生物限度检查理念中国药品生物制品检定所无菌性检查有效的方法方法验证结果判断SOP操作环境保证01有效的结果培养基保证02可靠的结论灵敏度检查03中国药品生物制品检定所实验设施（硬件——物质保障）检验程序（软件——有效的结果）结果判断（调查——可靠的结论）微生物检查的过程控制中国药品生物制品检定所01实验室系统操作环境关键设备对照培养基02物质保障03一、实验设施中国药品生物制品检定所有效性：整体10000级、局部100级。洁净实验条件安全性：保护样品、人员和环境。可操作性：方便、快捷、顺畅。洁净实验条件的维护、验证阳性菌实验室达到P2生物安全标准（一）、实验室系统中国药品生物制品检定所实验室改造示例：原布局图

拟定布局图

建议布局图1

建议布局图2

实验室系统——中检所微生物实验室中国药品生物制品检定所实验室系统的管理与维护：屏障系统的有效性压差、风速、微粒、照度（外包服务合同）12345环境菌库酒精棉球分离微生物新洁尔灭分离微生物清洁、静态与动态监控、熏蒸（一）、实验室系统环境菌库中国药品生物制品检定所洁净环境常见菌（浮游菌）：头状葡萄球菌（Staphylococcus?capitis）溶血葡萄球菌（Staphylococcus?haemolyticus）缓症链球菌（Streptococcus?mitis）科氏葡萄球菌（Staphylococcus?cohnii）藤黄微球菌（Micrococcus?luteus）1中国药品生物制品检定所2隔离器生物安全柜超净工作台（二）、操作环境中国药品生物制品检定所（二）、操作环境分类样品安全人员安全环境要求点评隔离器？验证困难，灭菌不彻底：假阳性灭菌剂残留：假阴性生物安全柜？动态验证困难，不适合多任务的检验活动超净工作台经典、廉价、适合多任务的检验活动。提高实验室新风供给、加强实验室监控可以扬长避短搽拭中国药品生物制品检定所菌液稀释、分液的误差为：5.5%表面搽拭操作的回收率大于99%实验菌株菌液计数回收计数回收率大肠埃希菌1918