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黄曲霉毒素检验原始记录

一、样品信息

(1)样品信息：本次检验的样品为某品牌花生油，采样时间为2023年3月15日，采样地点位于我国某大型超市。样品编号001，采样重量为500克。根据国家食品安全标准，花生油中黄曲霉毒素B1的限量标准为20微克/千克。在采样前，样品已经过感官检验，未发现异常。样品在运输过程中，严格按照食品安全要求进行，避免阳光直射和高温环境，确保样品的完整性和检验结果的准确性。

(2)样品来源：该品牌花生油自2023年1月开始上市销售，产品包装上明确标注了生产日期、保质期、生产批号等信息。此次采样是为了评估该品牌花生油在市场上的质量状况，保障消费者的饮食安全。根据市场调查，该品牌花生油在消费者中的口碑良好，销量一直处于稳定增长状态。在采样过程中，严格遵循随机抽样的原则，确保样本的代表性。

(3)样品处理：样品在收到实验室后，立即进行编号、登记，并放置于4℃冰箱中保存。为避免样品受到污染，实验室工作人员穿戴无菌操作服，使用无菌工具进行样品处理。样品处理过程中，严格按照GB/T5009.24-2016《食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B1的测定》进行。具体操作步骤如下：首先，将样品进行均质处理，取适量均质液加入提取剂，进行超声提取；然后，通过液-液分配法对提取液进行净化；最后，采用高效液相色谱法（HPLC）进行检测。在整个样品处理过程中，严格控制操作条件，确保检验结果的准确性和可靠性。

二、检验方法与原理

(1)检验方法：本次黄曲霉毒素B1的检测采用高效液相色谱法（HPLC）结合荧光检测器。该方法灵敏度高，线性范围宽，适用于低浓度样品的检测。具体操作步骤包括样品前处理、液-液分配、净化和HPLC分析。以某品牌花生油为例，该方法在添加浓度为5微克/千克的黄曲霉毒素B1标准品时，其检测限为0.5微克/千克，准确度在90%以上。

(2)原理简介：高效液相色谱法是基于样品组分在固定相和流动相之间分配系数的差异进行分离的一种技术。黄曲霉毒素B1在特定条件下，其分子结构中的芳香族环和三碳链与荧光试剂发生反应，产生特定的荧光信号。通过测定荧光强度，可以定量分析样品中黄曲霉毒素B1的含量。实验中，采用C18色谱柱，流动相为乙腈-水，流速为1.0毫升/分钟。

(3)检测条件：在HPLC分析过程中，检测波长为365纳米，激发波长为435纳米。为提高检测灵敏度，实验中采用柱前衍生化技术，将黄曲霉毒素B1转化为荧光衍生物。通过优化流动相组成和梯度洗脱程序，确保样品中黄曲霉毒素B1得到有效分离。以某品牌花生油样品为例，该方法在添加浓度为10微克/千克的黄曲霉毒素B1标准品时，回收率在80%-110%之间，满足国家标准要求。

三、仪器与试剂

(1)仪器设备：本次黄曲霉毒素B1检验过程中，所使用的仪器设备包括高效液相色谱仪（HPLC）一台，型号为Agilent1260Infinity，配有荧光检测器（FLD）和自动进样器。此外，还配备了超声波清洗仪、旋转蒸发仪、涡旋混合器、电子天平（精确至0.01毫克）、液相色谱柱（C18，4.6×250毫米，5微米）以及相应的色谱柱保护套件。以某品牌花生油样品的检测为例，该HPLC系统在运行过程中，能够稳定输出数据，平均检测时间为5分钟，仪器运行状态良好。

(2)试剂与耗材：检验过程中使用的试剂包括乙腈（色谱纯）、甲醇（色谱纯）、磷酸二氢钾（分析纯）、无水硫酸钠（分析纯）、三氟乙酸（分析纯）等。此外，还使用了黄曲霉毒素B1标准品（纯度≥98%），浓度为1微克/毫升。耗材方面，使用了一次性滤膜、玻璃纤维滤纸、进样针、色谱柱保护套件、移液枪等。以某品牌花生油样品的检测为例，所有试剂均经过严格筛选，确保检验结果的准确性和可靠性。

(3)仪器维护与校准：为确保HPLC系统的稳定运行和检测结果的准确性，定期对仪器进行维护和校准。具体操作包括：清洗仪器各部件，更换滤膜，检查色谱柱性能，调整流速和柱温等。此外，还定期对荧光检测器进行校准，确保其检测灵敏度。以某品牌花生油样品的检测为例，通过定期维护和校准，HPLC系统在检验过程中表现稳定，未出现异常情况。在检验过程中，严格遵守操作规程，确保实验数据的准确性。

四、检验步骤与结果记录

(1)样品前处理：首先，将采集到的花生油样品置于4℃冰箱中保存。待样品稳定后，使用电子天平准确称取一定量的样品（例如10克），加入适量的乙腈溶液，进行均质处理。使用超声波清洗仪进行超声提取，提取时间为30分钟。提取完成后，将提取液转移至旋蒸瓶中，在45℃下旋转蒸发至近干。随后，用少量流动相复溶于1.0毫升容量瓶中，涡旋混合均匀，经0.45微米滤膜过滤，滤液作为待测样品。

(2)液-液分配与净化：取1.0毫升滤液于10毫升离心管中，加入5