青霉素生产工艺.ppt

青霉素的制备理化性质：溶解性：受pH影响游离酸：易溶于有机溶剂，难溶于水盐：易溶于水，几乎不溶于有机溶剂，当有机溶剂中含少量水时，溶解度增大。酸碱性：有机弱酸稳定性：干燥纯净的盐固体稳定；纯有机溶剂溶液稳定；遇酸碱易分解；в-内酰胺环易为亲核或亲电试剂作用而打开失活；青霉素的水溶液不稳定。

温度、pH对其稳定性的影响--------------------------------------------124降解反应聚合反应氨苄青霉素在水溶液中易形成聚合物，是氨苄青霉素过敏反应的主要过敏原之一。过敏反应可能为青霉噻唑多肽和青霉噻唑蛋白最早的原始菌种是点青霉菌(Penicilliumnotatum)；01按菌丝的形态分为丝状菌（黄孢子和绿孢子）和球状菌（绿孢子和白孢子）两种。03现用产黄青霉菌(Pen.chrysogenum)02国内青霉素生产厂大都采用绿色丝状菌，有的厂家用白孢子球状菌。04菌种（B）、制备工艺2、发酵工艺流程大米茄子瓶丝状菌发酵工艺流程2）球状菌培养工艺流程球状菌菌种亲米孢子生产米孢子种子液发酵液（亲米孢子培养）亲米锥形瓶25度，6-8d冷冻管（生产米孢子培养）大米茄子瓶25度，8-10d种子罐培养种子罐28度，50-60h，1.5v/(v*min)发酵罐培养发酵罐26度，，6-7d，0.8-1.0v/(v*min)丝状菌：种子：砂土孢子接入斜面上，25℃培养6～7天，制成悬液，接入大米茄子瓶内，经25℃培养6～7天，制成大米孢子，真空干燥。生产时按接种量移入种子罐（葡萄糖、玉米浆、尿素），25℃培养40～45小时，菌丝浓度达40%以上，按10%-15%接种量移入繁殖罐（花生饼粉、葡萄糖）内。经25℃培养13～15小时，菌丝体积40%以上，残糖在1.0%左右，无菌检查合格便可作为种子，按30%接种量移入发酵罐。3、发酵工艺要点球状菌：首先由冷冻管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米浆的摇瓶培养原始亲米孢子，再接入大米茄子瓶生产大米孢子，两者都是在25度下静置培养10天可收获。保存在5度冰箱。种子培养：冷藏10天以内的生产米，接入种子罐（花生饼粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、饴糖）28度培养50-60h，当PH降为5.5-5.0，菌丝呈菊花团状，平均直径在100-130微米，每毫升球菌数6万-8万只，沉降率在85%以上，可用。接入发酵罐。培养基碳源：提供能量如乳糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉、天然油脂等。乳糖能被产生菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件，故为最佳碳源，但价格高，普遍使用有困难。天然油脂如玉米油、豆油也能被缓慢利用作为有效的碳源，但不可能大规模使用。目前生产上用的碳源是葡萄糖母液和工业用葡萄糖。丝状菌补糖一般在残糖降至0.6%左右、PH上升后开始加，0.07-0.15%/次，次/h;球状菌在PH高于6.5时开始加糖。氮源：提供蛋白合成原料玉米浆。现因国内玉米浆产量少，经调整配方以花生饼粉代替，生产水平也可达到技术指标。目前生产上用的氮源是花生饼粉、麸质粉玉米胚芽粉及尿素等。前体作为苄青霉素生物合成的前体有苯乙酸、苯乙酰胺等。它们一部分能直接结合到青霉素分子中。这些前体对青霉菌都有一定的毒性，加入量不能大于0.1%。加入硫代硫酸钠能减少它们的毒性。硫和磷:硫浓度降低时青霉素产量减少3倍，磷浓度降低时青霉素产量减少1倍。01铁离子：铁易渗入菌丝内，它对青霉素发酵有毒害作用。发酵液中铁含量6微克/毫升时无影响；60微克/毫升时降低产量30%；300微克/毫升时降低产量90%。要低于30微克/ml03钙、镁和钾：青霉素的生物合成中合适的阳离子比例以钾30%、钙20%、镁41%为宜。如镁离子少，钾离子多时，菌丝细胞将培养基中氮源转化成各种氨基酸的能力强。钙离子影响细胞的生长和培养基的pH。02无机盐菌丝生长繁殖期:发芽、菌丝增殖、形成脂粒、积累藏物。01菌丝自溶期:03青霉素分泌期:菌丝生长趋势减弱，间隙添加葡萄糖作碳源和间隙加入花生饼粉、尿素作氮源，并间隙加入前体，此期间球状菌pH要求6.6～6.9，丝状菌pH要求6.2～6.4，青霉素分泌旺盛。02产黄青霉菌分三个不同代谢时期。