荧光色谱-柱后光化学衍生法测定食品中的黄曲霉毒素B1.docxVIP

PAGE

1-

荧光色谱-柱后光化学衍生法测定食品中的黄曲霉毒素B1

一、1.引言

(1)食品安全是关系到人类健康和社会稳定的重要问题，而真菌毒素污染则是食品安全领域中的一个重要风险因素。其中，黄曲霉毒素B1（AflatoxinB1，AFB1）是一种常见的真菌毒素，主要由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生。AFB1具有极强的毒性和致癌性，对人体健康造成严重威胁。根据世界卫生组织（WHO）的数据，AFB1是全球公认的致癌物质之一，也是导致肝癌的主要原因之一。

(2)由于AFB1的毒性和致癌性，各国都对食品中的AFB1含量设定了严格的限量标准。例如，我国《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》规定，大米、花生及其制品中AFB1的最大允许含量分别为0.5μg/kg和4μg/kg。然而，由于AFB1的检测方法复杂、成本高、耗时较长等原因，使得食品生产企业和监管部门难以对AFB1进行有效监控。

(3)针对AFB1的检测，荧光色谱-柱后光化学衍生法（FluorescenceChromatography-Post-columnPhotochemicalDerivatization，FC-PD）是一种高效、灵敏、快速的检测方法。该方法利用荧光检测器对衍生化后的AFB1进行定量分析，具有高选择性和低检测限等优点。近年来，随着科学技术的发展，FC-PD在食品、药品、化妆品等领域得到了广泛应用。例如，美国食品药品监督管理局（FDA）已将FC-PD作为AFB1检测的首选方法。此外，FC-PD在检测过程中可实现自动化操作，提高了检测效率和准确性。

二、2.黄曲霉毒素B1概述

(1)黄曲霉毒素B1（AflatoxinB1，AFB1）是一种强致癌性的真菌毒素，主要由黄曲霉属（Aspergillusflavus）和寄生曲霉属（Aspergillusparasiticus）产生。AFB1主要污染粮食作物，如玉米、花生、大豆和小麦等，以及一些油料作物和坚果。据世界卫生组织（WHO）统计，全球每年约有10亿人口暴露于AFB1污染的食品中。研究表明，长期摄入AFB1污染的食品是导致肝癌的主要原因之一。

(2)AFB1的分子结构中含有两个呋喃环和一个香豆素结构，具有高度的稳定性和毒性。AFB1的半数致死剂量（LD50）为0.36mg/kg体重，对人体健康危害极大。AFB1的致癌性已被国际癌症研究机构（IARC）列为1类致癌物，即对人体有明确致癌性的物质。据统计，AFB1污染导致的肝癌病例占全球肝癌总数的16%左右。

(3)由于AFB1的毒性和致癌性，各国政府和国际组织对食品中的AFB1含量设定了严格的限量标准。例如，我国规定，大米、花生及其制品中AFB1的最大允许含量分别为0.5μg/kg和4μg/kg。美国、欧盟等国家和地区也制定了类似的限量标准。为了确保食品安全，研究人员开发了多种AFB1的检测方法，如薄层色谱法（TLC）、高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱-质谱联用法（GC-MS）等。其中，荧光色谱-柱后光化学衍生法（FC-PD）因其高灵敏度和快速检测等优点，被广泛应用于AFB1的定量分析。

三、3.荧光色谱-柱后光化学衍生法的原理与操作

(1)荧光色谱-柱后光化学衍生法（FC-PD）是一种基于荧光检测的高灵敏度分析方法，主要用于食品、药品和环境样品中黄曲霉毒素B1（AFB1）的测定。该方法的基本原理是在色谱分离后，通过柱后衍生化反应将AFB1转化为具有荧光性质的衍生物，再利用荧光检测器对其进行定量分析。

(2)在FC-PD操作中，首先将待测样品通过液相色谱（HPLC）或气相色谱（GC）进行分离，AFB1与样品中的其他组分分离后，进入柱后衍生化系统。衍生化过程中，AFB1与特定的衍生化试剂发生反应，生成具有强荧光的衍生物。随后，衍生化产物进入荧光检测器，通过检测其荧光强度来定量AFB1的含量。

(3)FC-PD操作流程包括样品前处理、色谱分离、柱后衍生化和荧光检测等步骤。样品前处理通常包括提取、净化和浓缩等过程，以确保待测物的高纯度和高浓度。色谱分离阶段，利用合适的色谱柱和流动相条件将AFB1与其他组分分离。柱后衍生化系统通过精确控制反应条件，确保衍生化反应的完全进行。最后，荧光检测器对衍生化产物进行检测，得到AFB1的定量结果。

四、4.实验方法与条件优化

(1)在荧光色谱-柱后光化学衍生法（FC-PD）中，实验方法的优化对于提高检测灵敏度和准确度至关重要。实验方法优化主要包括样品前处理、色谱条件选择、衍生化反应条件和荧光检测参数的优化。例如，对于花生样品中AFB1的检测，通过比较不同溶剂的提取效率和净化效果，发现乙腈/水（80:20，v/v）的提取液和C18固相萃取柱（SPE）的净化效果最佳。

(2)色谱条件的选择对AFB1的分离效果影