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李凡他试验、潘氏试验、血浆鱼精蛋白副凝固试验、抗人球蛋白试验等原理、临床表现及影响因素
李凡他实验
??原理
李凡他试验(Rivalta试验),又称黏蛋白定性检查,黏蛋白是一种酸性糖蛋白,浆膜间皮细胞受炎症刺激时分泌增加,其等电点为pI3-5,可在稀乙酸中出现白色雾状沉淀。
浆膜腔积液漏出液中只有微量的黏蛋白,李凡他试验为阴性。当炎症时,浆膜腔上皮细胞被刺激分泌黏蛋白增多,李凡他试验为阳性。
??临床意义
1)李凡他试验是一种简单的黏蛋白筛检试验,可帮助鉴别炎性积液和非炎性积液。
2)阳性时渗出液由炎症引起,常见于感染性、非感染性因素,有时可见于恶性肿瘤。
3)阴性是漏出液属非炎症性,由于血浆胶体渗透压降低,血管内压力增高,淋巴管阻塞等原因形成。
??影响因素
1)肝硬化腹腔积液的患者,由于胸腹水中球蛋白增高且不溶于水,使得样本呈现云雾状浑浊,李凡他试验可呈假阳性。
2)血性积液测定蛋白质时也可能出现假阳性,应离心后取上清液再进行李凡他试验。
3)浆膜腔内漏出液经长期吸收蛋白质浓缩后,也可呈现假阳性。
潘氏试验
??原理
潘氏试验(Pandy试验)又称球蛋白定性试验,脑脊液在病变时,蛋白有不同程度的增加,多为球蛋白增加。脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉,产生白色浑浊或沉淀,即为潘氏试验阳性。
??临床意义
1)正常脑脊液含有极微量的蛋白质,潘氏试验为阴性反应。
2)阳性常见于脑组织和脑膜炎症性病变,如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、脊髓灰质炎、流行性脑炎等。脑组织感染时脑膜和脉络丛毛细血管通透性增加,随后白蛋白、球蛋白和纤维蛋白均增高,因此潘氏试验呈阳性反应。
3)多发性硬化症、亚急性硬化性全脑炎、小儿结节病等可出现蛋白选择性增高,潘氏试验为阳性。
4)病毒性脑炎、蛛网膜下腔出血、脑梗阻、脑肿瘤时蛋白可轻度增加,潘氏试验阳性。
5)脑出血、脑外伤(血液混入脑脊液中)时,潘氏试验为强阳性。
??影响因素
1)苯酚溶液的浓度不同对潘氏试验的结果有影响,随着其浓度的增加,试验的敏感性增高。
2)在操作时如发现脑脊液标本浑浊或呈血性时,应先将标本离心,再取上清液作试验。
3)试验所用试管等耗材必须清洁,否则易造成标本假阳性。
血浆鱼精蛋白副凝固试验(3P试验)
??原理
在待测血浆中加入鱼精蛋白,使可溶性纤维蛋白单体与FDP形成的可溶性复合物解离,游离的纤维蛋白单体(FM)再聚合成肉眼可见的纤维状、絮状或胶冻状物,这种不需加凝血酶使血浆发生凝固的试验,称为血浆鱼精蛋白副凝固试验,也即3P试验。
??临床意义
1)3P试验可说明血中纤维蛋白单体以及FDP含量增多,是DIC的确诊的实验依据之一。
2)急性DIC时,3P试验阳性率为68.1~78.9%。DIC早期和中期,3P试验为阳性;但DIC晚期时,纤溶物质极为活跃,纤维蛋白单体及纤维蛋白碎片(大分子FDP)均被消耗,故此期3P试验多呈阴性。
3)鉴别原发性和继发性纤溶亢进:在原发性纤溶亢进中,FM并不升高,3P试验为阴性。继发性纤溶亢进时,3P试验为阳性。
4)血栓性疾病、溶栓治疗期、血液高凝状态等,3P试验可呈阳性。
5)静脉血栓形成、肺梗死、脓毒血症、严重感染、休克、烧伤等,3P试验也可呈阳性。
6)3P试验与D-二聚体和血浆FDP联合检测:3P试验虽敏感性不及后两者,但其特异性较高。研究表明,多项指标的联合检测可使DIC的诊断率提高至90%以上,而单项指标的诊断率一般不超过80%,尤其是对于DIC的早期诊断。因此,联合检测可降低DIC的漏诊率,增加试验的可靠性和有效性。
??影响因素
1)血液处于高凝状态,即使不加鱼精蛋白,纤维蛋白单体也容易聚集形成肉眼可见的凝集状,所以会造成假阳性。
2)在肿瘤、上消化道出血、败血症、人工流产、分娩时,3P试验可为假阳性。
3)应用血凝酶治疗后可使患者3P试验阳性率增加,D-二聚体定量升高,停药3d后血凝酶对3P试验阳性率及D-二聚体定量的影响减小。
抗人球蛋白试验(Coombs试验)
??原理
抗人球蛋白试验是检测自身免疫性溶血性贫血(AIHA)自身抗体的常用方法,直接试验是检查被检红细胞上有无不完全抗体,间接试验是检查血清中游离的不完全抗体。直接Coombs试验较间接试验对AIHA更有诊断价值。
??临床意义
1)Coombs试验主要用于AIHA的诊断和分型诊断。
2)自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合征、阵发性冷性血红蛋白尿症、新生儿同种免疫性溶血、溶血性输血反应等,可使直接Coombs试验阳性。
3)系统性红斑狼疮、传染性单核细胞增多症、类风湿性关节炎、恶性肿瘤及某些慢性肝肾疾病等,直接Coombs
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