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大米中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的测定

一、1.样品准备与处理

(1)样品采集：根据《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》（GB2761-2017）的要求，大米样品的采集应在生产、储存、运输、销售等环节进行。采集过程中，应确保样品的代表性和均匀性。通常，采集量不少于500克，以备后续检测和分析。例如，在2019年某地区大米市场抽检中，共采集了100份大米样品，其中合格样品85份，不合格样品15份。

(2)样品前处理：样品采集后，需进行前处理以去除杂质和便于检测。首先，将样品在室温下自然风干，然后研磨成粉末，过筛以得到均匀的粉末样品。对于黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测，需要将样品进行提取和净化。提取通常采用高效液相色谱法（HPLC）或固相萃取（SPE）等方法，以提取样品中的真菌毒素。例如，某实验室使用HPLC法提取了50份大米样品中的黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A，提取效率达到90%以上。

(3)样品储存：在样品前处理过程中，样品的储存条件至关重要。为防止真菌毒素降解，样品应储存在-18℃以下的低温冰箱中。同时，为避免交叉污染，每个样品应使用独立的容器储存。在储存期间，应定期检查样品状态，确保样品未发生变质。例如，某实验室在-18℃条件下储存了100份大米样品6个月，检测结果显示，所有样品的黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A含量均未超过国家标准限量。

二、2.黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的检测方法

(1)检测原理：黄曲霉毒素B1（AFB1）和赭曲霉毒素A（OTA）的检测主要基于高效液相色谱法（HPLC）结合荧光检测器或紫外检测器。该方法基于真菌毒素的特异性荧光或紫外吸收特性，通过高效液相色谱分离样品中的真菌毒素，然后使用检测器进行定量分析。例如，某研究采用HPLC-FLD（荧光检测器）对100份大米样品中的AFB1和OTA进行检测，检测限分别达到0.5ng/g和1ng/g，平均回收率分别为92.5%和88.3%。

(2)样品前处理：样品前处理是确保检测准确性的关键步骤。通常包括样品研磨、提取、净化和浓缩等步骤。提取方法通常采用溶剂萃取法，如乙腈、甲醇等。净化步骤通常使用C18固相萃取柱（SPE）或石墨化碳黑（GCB）柱进行，以去除干扰物质。例如，某实验室对50份大米样品进行前处理后，使用HPLC-FLD检测，发现AFB1的检测限为0.5ng/g，OTA的检测限为1ng/g，样品回收率在80%至100%之间。

(3)检测流程与质量控制：检测流程包括样品准备、仪器调试、样品分析、数据处理和结果报告等步骤。在样品分析过程中，需严格控制实验条件，如柱温、流速、流速稳定性和检测器设置等。为保障检测质量，实验室应定期进行内部和外部质量控制。例如，某实验室在AFB1和OTA的检测中，采用了标准曲线法进行定量分析，并使用国家标准品进行校正。在检测过程中，实验室内部质量控制结果显示，AFB1和OTA的平均相对标准偏差（RSD）分别为2.1%和1.8%，外部质量控制结果显示，实验室检测结果与参考值的一致性良好。

三、3.检测结果的分析与评价

(1)检测结果判定：根据《食品安全国家标准食品中真菌毒素限量》（GB2761-2017）的规定，大米中AFB1和OTA的最大允许限量为10ng/g和5ng/g。在检测结果的分析与评价中，首先需对每个样品的检测结果进行判定。例如，某地区2020年对100份大米样品进行AFB1和OTA检测，结果显示，有20份样品的AFB1含量超过10ng/g，5份样品的OTA含量超过5ng/g，这些样品被判定为不合格。

(2)数据统计分析：对检测结果进行统计分析，有助于了解地区或行业的大米质量状况。通常采用描述性统计方法，如计算平均值、标准差、最大值、最小值等。例如，某研究对100份大米样品的AFB1和OTA含量进行统计分析，结果显示，AFB1的平均含量为4.5ng/g，标准差为1.2ng/g；OTA的平均含量为2.8ng/g，标准差为0.7ng/g。这些数据有助于对大米中真菌毒素的污染程度进行评价。

(3)检测结果趋势分析：通过对比不同年份、不同地区或不同类型的大米样品的检测结果，可以分析真菌毒素的污染趋势。例如，某研究对2009年至2020年期间收集的大米样品进行AFB1和OTA检测，发现AFB1的平均含量呈现逐年下降趋势，而OTA的平均含量则相对稳定。这可能与我国食品安全监管力度加大、种植技术改进等因素有关。通过对检测结果的长期跟踪和分析，可以为政策制定和监管提供科学依据。

四、4.检测过程中的质量控制与注意事项

(1)试剂和耗材管理：在检测过程中，应严格管理试剂和耗材，确保其质量符合检测要求。试剂应选择经过验证的品牌和规格，避免使用过期或受污染的试剂。耗材如固相萃取柱、滤膜等应使