诊断学实习指导：实验诊断PPT教学课件.pptx

诊断学实习指导第三部分实验诊断

实习一红细胞计数实习二血红蛋白测定实习三白细胞计数及分类实习四血小板检查(示教)实习五骨髓细胞学检查(示教)实习六尿液检査实习七肾功能试验(示教)实习八粪便检查

01实习一红细胞计数

实习一红细胞计数目的要求1．掌握红细胞计数的方法及原理。2．熟悉移液器的使用方法。3．了解周围血采集方法。

实习步骤用等渗稀释液（生理盐水）将血液稀释一定倍数，充入血细胞计数池，计数一定体积内的红细胞，经换算计算出每升血液中红细胞数量。实习一红细胞计数

实习器材显微镜、血细胞计数板、血盖片、生理盐水、一次性塑料试管、75%乙醇（酒精）棉签、干棉签、一次性采血针、移液器、一次性吸头。实习一红细胞计数

实习内容(一)前期工作（1）准备：取一支塑料试管，加取生理盐水1.99mL。（2）采血：用75%乙醇棉签消毒被检查者左手中指或环指指腹，检查者左手捏紧被检查者采血部位，右手持刺血针，迅速刺入皮内，让血液自然流出，用干棉签擦去第一滴血液后，用移液器吸取第二滴血液的10μL。（3）稀释：用干棉签擦净移液器吸头外附着的血液，左手持装有1.99mL生理盐水的试管，右手将移液器吸头垂直插入试管近最低部，将血液溶入溶液中，然后再吸取上清溶液洗涤数次，使血液充分溶入溶液中，立即混匀（用双手旋转试管），稀释倍数是200倍。实习一红细胞计数

实习内容（4）充池：血细胞计数板及血盖片必须擦干净，将血盖片放置计数板中部，用移液器吸头吸取10μL红细胞悬液，滴入血盖片边缘下的计数板上，液体自然充盈计数池内。静置2～3分钟后，待红细胞充分黏附在计数板上，显微镜低倍镜下计数。血细胞计数板正侧面见图3-1。实习一红细胞计数

实习内容实习一红细胞计数

实习内容（5）计数：先用低倍镜调清计数板上的方格，然后观察红细胞分布是否均匀，低倍镜（10×10）下计数。在中央大方格中计数四角和中心的5个中方格的红细胞数（见图3-2、图3-3）。计数方法要按顺序计数每个中方格触及四边双线上的红细胞，原则是计上不计下、计左不计右。若每个中方格的红细胞数值彼此相差超过15个时，表示混合不均匀，应重新操作。实习一红细胞计数

实习内容实习一红细胞计数

实习内容（6）计算：红细胞数/L＝5个中方格内红细胞总数×5、×10、×200、×106。①×5——25个中方格内红细胞总数。②×10——由0.1mm换算成1mm。③×200——液体稀释的倍数。④×106——由微升换算成升。实习一红细胞计数

实习内容(二)血细胞计数板的应用1.血细胞计数板的构造、原理血细胞计数板由优质厚玻璃制成。计数板的中央部分有4条沟，形成3条隆起，两边较窄的隆起供放盖玻片用；中央较宽的隆起部分刻有2个计数室，用来计数血细胞。中央隆起部比两边的隆起低0.1mm。盖上特制盖玻片后计数室的深度为0.1mm。血细胞计数板的种类很多，但其基本原理相同。临床常用改良牛鲍尔(Neubauer)计数板。在低倍显微镜下，可见每一计数室用双线分成9个大方格，每个大方格边长为1.0mm。其中，四角上的4个大方格用单线划分为16个中方格(中方格边长为0.25mm)。中央的一个大方格用双线等分为25个中方格(中方格边长为0.2mm)。每个中方格又被单线分为16个小方格。中央的大方格供红细胞计数用。四角的4个大方格供白细胞计数用（见图3-2）。实习一红细胞计数

实习内容2.血细胞计数板的维护实验前应先将血细胞计数板洗净、干燥。计数板在用自来水洗净后，可用纱布或擦镜纸轻轻拭干，切不可用乙醇或乙醚洗涤，以免损坏计数板上的刻度。盖玻片用自来水洗净后拭干时要小心，以防破裂。实习一红细胞计数

实习内容(三)移液器的使用1.移液器的种类、工作原理移液器又称加样器，是先进的实验室工具，可以代替各种吸量管，具有操作方便、准确及易于掌握等优点，可分为固定式和可调式两种。移液范围含盖从1μL到1mL之间的各种量度。它的吸头是一次性，用于采取血液样本，可以避免实验室交叉传染。移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下，排出部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排出液体。使用移液器时，配合弹簧的伸缩性特点来操作，可以很好地控制移液的速度和力度(见图3-4)。实习一红细胞计数

实习内容实习一红细胞计数

实习内容2.移液器的使用方法(1)量程的调节：在调节量程时，如果要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可；但如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。在该过程中，千万不要将按