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第2节微生物的培养技术及应用(一)微生物的基本培养技术
01能阐明无菌技术的类型、适用范围和操作方法。02能概述不同类型培养基的特点及适用场景。03能尝试完成微生物的纯培养实验的操作。
一些人会在家里自制酸奶。自制酸奶虽然方便,但是食用自制酸奶导致肠胃不适的事例屡见不鲜,主要原因是在制作过程中有杂菌混入。那么,怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物中呢?防止杂菌污染,获得纯净的微生物实验室培养微生物的需要做到?从社会中来
实验室培养微生物培养基确保其它微生物无法混入分离需要的微生物无菌技术纯化培养提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件从社会中来
1.培养基的概念和作用(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,即培养基。(2)培养基的作用:用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。一、培养基的配制
2.培养基分类按物理性质液体培养基固体培养基琼脂无动力有动力(弥散)半固体培养基
化学成分来源划分培养基种类特点用途功能用途划分含化学成分不明确的天然物质工业生产分类、鉴定天然培养基合成培养基用已知成分的化学物质配制在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物培养基中加入能与目的菌的代谢产物发生显色反应的指示剂,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物选择培养基鉴别培养基
【任务一】结合提供的资料和教材中“表1-11000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成”,分析培养微生物的培养基的种类和营养构成。组分含量提供的主要营养牛肉膏5g碳源、磷酸盐和维生素蛋白胨10g氮源和维生素等NaCl5g无机盐H2O定容至1000mL水3.培养基的配制
(1)基本成分:碳源、氮源、水、无机盐①碳源无机碳源:有机碳源:CO2、CO32-、HCO3-葡萄糖等糖类、油/脂肪、石油等自养异养②氮源无机氮源:有机氮源:NH4+、NO3-、硝酸盐、铵盐尿素、玉米浆、蛋白胨等③水④无机盐:磷酸盐、Ca、Mg、K、Na、Fe、微量元素等为什么培养基需要氮源?培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的。
(2)还需满足微生物对pH、特殊营养物质、氧气的需求培养乳酸菌需要添加维生素培养霉菌时需将PH调至酸性,培养细菌时将PH调至中性或微碱性培养厌氧微生物时需要提供无氧条件生长因子:通常是指微生物自身不能合成或合成量不足,但又是微生物生长和代谢所必需的小分子。如某些维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。酵母浸粉、牛肉浸膏或植物组织提取液等天然物质中含有不同的生长因子。
微生物碳源氮源能源蓝细菌硝化细菌根瘤菌大肠杆菌CO2NH4+、NO3-等光能CO2NH3NH3的氧化糖类等有机物N2有机物糖类、蛋白质等有机物蛋白质等有机物1.自养型微生物与异养型微生物培养基的主要差别在于;2.无机氮源不但能给自养型微生物提供,也能作为,3.含有C、H、O、N的有机物可作为微生物的碳源、氮源、能源;碳源氮源能源物质异养型完成下面表格并分析:
4.常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基组分含量提供的主要营养牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5gH2O定容至1000mL水1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成碳源、氮源、磷酸盐和维生素等氮源、碳源和维生素等无机盐
微生物接种操作时为什么要“全副武装”和在专门的设备内进行?
二、无菌技术1.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。2.无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括消毒和灭菌。①消毒
课外拓展
芽孢:有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成一个椭圆形的休眠体,叫作芽孢。芽孢壁很厚,对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如,有的细菌的芽孢,煮沸3小时以后才死亡。孢子:细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞。能直接长成新个体。课外拓展
消毒(1)煮沸消毒法针对某些实验器具、餐具、饮用水等,在100℃下煮沸5~6min,可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢。(2)巴氏消毒法62~65℃下煮30min或80~90℃处理30s~1min,适合不耐高温的液体,如牛奶。可以杀死牛奶中的绝大多数微生物,并且不破坏牛奶的营养成分。(3)化学药物消毒法(4)紫外线消毒法紫外线可以使蛋白质变性并损伤生物的DNA。接种室、接种箱或超净工作台可用紫外线照射30min。在照射前,适量喷洒石碳酸或煤酚皂溶液等消毒液,加强消毒效果。70%-75%酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等。
灭菌(1)湿热灭菌这是一种利用沸水、流
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