T CITS 0012—2023 牛乳基婴幼儿配方乳粉及牛乳中A1和A2 β-酪蛋白的测定 液相色谱-串联质谱法.pdfVIP

ICS67.100.99

CCSX16

团体标准

T/CITS0012—2023

牛乳基婴幼儿配方乳粉及牛乳中A1和A2

β-酪蛋白的测定液相色谱-串联质谱法

DeterminationofAlandA2β-caseininbovineinfantformulaandmilk

LC-MS/MSmethod

2023-07-06发布2023-08-01实施

中国检验检测学会发布

T/CITS0012—2022

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规

则》的规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中国检验检测学会提出并归口。

本文件起草单位：雀巢食品安全研究院、中国海关科学技术研究中心、青岛海关技术中

心、上海海关动植物与食品检验检疫技术中心。

本文件主要起草人：鲍蕾、冯鑫、张鸿伟、吕佳、汪龙飞、张晓梅、王金花、韩深、古

淑青、梁成珠。

T/CITS0012—2022

牛乳基婴幼儿配方乳粉及牛乳中A1和A2β-酪蛋白的测定

液相色谱-串联质谱法

1范围

本规程规定了牛乳基婴幼儿配方乳粉和牛乳中A1β-酪蛋白(Alβ-Casein)、A2β-酪蛋白

(A2-βCasin)的测定方法。

本规程适用于牛乳基的婴幼儿配方乳粉和液态乳中A1β-酪蛋白、A2β-酪蛋白含量的测

定。不适用于发酵乳制品和含水解或酶解酪蛋白产品。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适

用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文本。

3.1A1β-酪蛋白

是β-酪蛋白的一种变异体，其一级氨基酸序列中第67号位氨基酸为组氨酸。

3.2A2β-酪蛋白

是β-酪蛋白的一种变异体，其一级氨基酸序列中第67号位氨基酸为脯氨酸。

4方法原理

试样中的牛β-酪蛋白经尿素提取，二硫苏糖醇还原，碘乙酰胺烷基化，经胰蛋白酶酶解

为肽段，经液相色谱-三重四级杆质谱测定，同位素内标法定量。

5试剂和材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1碳酸氢钠(NaHCO)。

3

5.1.2碳酸氢铵(NHHCO)。

43

5.1.3二硫苏糖醇(CHOS，DTT)。

41022

5.1.4碘代乙酰胺(ICHCONH，IAA)。

22

T/CITS0012—2022

5.1.5尿素。

5.1.6乙酸(CHCOOH)。

3

5.1.7甲酸(HCOOH):色谱纯。

5.1.8乙腈(CHCN):色谱纯。

3

5.1.9碱性胰蛋白酶:活力大于10000BAEE每毫克蛋白质。

5.1.10牛β-酪蛋白标准品：纯度须准确标定，或经国家认证的标准物质。须依照附录A方

法对牛β-酪蛋白标准品中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白含量进行测定。

5.1.11牛A1β-酪蛋白特异肽标准品(序列:

IHPFAQTQSLVYPFPGPIHNSLPQNIPPLTQTPVVVPPFLQPEVMGVSK)，纯度不低于90%。

5.1.12牛A1β-酪蛋白同位素标记特异肽标准品(序列:

IHPFAQTQS(L*)VYPFPGPIHNS(L*)PQNIPP(L*)TQTPVVVPPF(L*)QPEVMGVSK)，纯度不

低于90%。

5.1.13牛A2β-酪蛋白特异肽