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非瑟酮通过CA9对头颈鳞状细胞癌的调控机制研究

摘要

研究目的：头颈鳞状细胞癌（HNSCC）是源于口腔、咽部和喉部的黏膜上皮细

胞的恶性肿瘤，全球每年报告超过50万例头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)病例，其发病

率仍在继续攀升，位列全球第六大常见癌症。头颈鳞状细胞癌起病隐匿，现有治疗

方案效果欠佳，患者生存率低，且接受治疗后患者生活质量差。为了提高患者生存

率，改善患者治疗后生存质量，亟需寻找新的治疗方案。非瑟酮（Fisetin）是一种黄

酮类化合物，能够通过多种途径抑制癌症，已在包括胃癌、乳腺癌、前列腺癌在内

的多种恶性肿瘤中明确其抗癌特性。而在头颈鳞状细胞癌中的作用仍待进一步研究。

前期研究表明，CA9作为非瑟酮的靶点之一，其催化二氧化碳和水转化为碳酸氢根

离子和质子，调节细胞内外PH。在恶性肿瘤中，CA9参与细胞增殖、迁移与侵袭。

因此，本研究通过构建小鼠肿瘤模型、药物处理头颈鳞状细胞癌细胞系以及敲低CA9

等方法，探究非瑟酮在头颈鳞状细胞癌中的作用和机制。

研究方法：（1）构建小鼠同种异体肿瘤模型：随机分为两组进行处理，探究非

瑟酮在小鼠体内条件下对肿瘤的发生发展的影响。（2）CCK8检测细胞增殖：通过

非瑟酮梯度浓度处理后的肿瘤细胞，评估其对肿瘤细胞的增殖活性的影响。（3）流

式细胞术检测非瑟酮处理后头颈鳞状细胞癌的细胞凋亡情况。（4）transwell实验检

测非瑟酮处理后，头颈鳞状细胞癌细胞的迁移能力变化。（5）qRT-PCR与Western

blot检测非瑟酮处理后肿瘤细胞中CA9基因与蛋白表达的变化趋势。（6）采用siRNA

转染构建CA9敲低组，利用qRT-PCR和Westernblot检测不同组别细胞中CA9的

mRNA相对表达水平和蛋白表达水平；CCK-8检测细胞增殖活性；transwell实验检测

细胞迁移能力；流式细胞术检测细胞凋亡情况。

研究结果：（1）非瑟酮能够抑制小鼠肿瘤模型中的肿瘤增长。（2）非瑟酮能

够抑制头颈鳞状细胞癌细胞的增殖、迁移，并诱导细胞凋亡。（3）非瑟酮能够显著

抑制靶点CA9基因与蛋白水平的表达，且呈浓度依赖性。（4）敲低CA9后，头颈鳞

状细胞癌细胞的增殖、迁移能力下降，并且诱导癌细胞的凋亡。

研究结论：非瑟酮能够抑制增殖、迁移能力及诱导凋亡，并通过调控CA9抑制

头颈鳞状细胞癌的发生发展。

硕士研究生：张明君（耳鼻咽喉科学）

指导教师：宋西成（教授）

关键词：头颈鳞状细胞癌；非瑟酮；CA9

Studyontheregulatorymechanismoffisetinonheadandneck

squamouscellcarcinomathroughCA9

Abstact

Objective:Headandnecksquamouscellcarcinoma(HNSCC)isamalignanttumor

originatingfrommucosalepithelialcellsintheoralcavity,pharynxandlarynx.Morethan

500,000casesofheadandnecksquamouscellcarcinoma(HNSCC)arereportedglobally

everyyear.Theratecontinuestorise,rankingasthesixthmostcommoncancerintheworld.

Headandnecksquamouscellcarcinomahasaninsidiousonset,existingtreatmentoptions

areineffective,patientsurvivalratesarelow,andpatientsqualityoflifeispoor