药物的含量测定方法与验证.ppt

（二）GC法1.对GC仪器一般要求载气：氮气色谱柱：填充柱或毛细管柱填充柱：内径2～4mm，长1～10m，内装吸附剂高分子多孔小球或涂渍固定液的载体毛细管柱：内径0.2～0.5mm，长10～100m，一般为空心柱，内壁或载体经涂渍或交联固定液检测器：氢火焰离子化检测器色谱图：30分钟内记录完毕2.色谱适用性实验：同HPLC3.测定法：同HPLC第四节药品分析方法验证目的：证明采用的方法适合于相应检测要求。起草药品质量标准生产工艺变更制剂组分改变原分析方法修订验证内容：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性均需对分析方法进行验证准确度（accuracy）：测量值与真实值接近的程度表示:回收率测定方法：回收试验加样回收试验01030204含量测定方法的准确度1.原料药：可用已知纯度对照品或供试品进行测定；或与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较2.制剂：考察其他组分和辅料对回收率的影响①用含已知量被测物的制剂各组分混合物（包括制剂辅料）进行测定，回收率计算同原料药②向制剂中加入已知量的被测物进行测定③与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较具体做法：测定高、中、低三个浓度，n=3,共9个数据来评价回收率；用UV和HPLC法时，一般回收率可达98%～102%；容量法可达99.7%～100.3%二、精密度（precision）：定义:同一样品多次测量值之间相互接近的程度表示：偏差，标准偏差,相对标准偏差1.偏差(deviation,d)d=测得值-平均值=Xi-X2.标准偏差（standarddeviation,SD或S）S=[(∑Xi–X)2/(n-1)]1/23.相对标准偏差(relativestandarddeviation,RSD)RSD=标准偏差/平均值×100%=S/X×100%重复性:同一实验室,同一人多次测定的精密度中间精密度:同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度重现性:不同实验室，不同人测定的精密度数据要求均应报告标准偏差、相对标准偏差和可信限专属性（specificity）:指在其他成分(如杂质、降解产物、辅料等)可能存在下，采用的方法能准确测定出被测物的特性（鉴别、杂质检查、含量测定方法，均应考察其专属性）鉴别反应应能与其它共存的物质或相似化合物区分，不含被测组分的样品均应呈现负反应12色谱法和其他分离法，应附代表性的图谱，以说明专属性。01图中注明各组分位置，色谱法中分离度应符合要求。02在能获得杂质的情况下，可加到试样中，考察对结果的干扰。03在杂质和降解物不能获得的情况下，可用以验证方法和药典方法进行对照；也可用对试样加速破坏的方法，比较两种方法。042.含量测定和杂质测定四、检测限（limitofdetection，LOD)是指试样中被测物能被检测出的最低浓度或量，是限度检验指标。它无需测定，只要指出高于或低于该规定的浓度或量即可。01目视法用含已知浓度被测物的试样进行分析，目视确定能被可靠地检测出的被测物的最低浓度或量，常用于显色鉴别法，TLC02当用GC和HPLC法时，一般以S/N＝2或3时的相应浓度来确定检测限。03定量限（1imitofquantitation，LOQ)是指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。杂质和降解产物进行定量测定时，要求LOQ。常用信噪比法确定定量限。一般以S/N=10时相应的浓度进行测定。线性（linearity）是指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度或量直接呈正比关系的程度。回归方程的相关系数（r）越接近1，表明线性越好可用一贮备液经精密稀释，或分别精密称样，制备一系列（至少5份）供试液进行测定，以响应值对浓度作图，建立回归方程，求出r如UV：制备一个标准系列，浓度点n=5建立回归方程C=aA+br＞0.9999CA500.22750.351000.451250.581500.69AC线性的偏离………﹍﹍﹍是指达到一定精密度、准确度和线性、测试方法适用的高低限度或量的区间。01如原料药和制剂含量测定：应为测试浓度的80%～120%