DB3301T 1062-2018 铁皮石斛组织培养育苗技术规程.docxVIP

DB3301

浙江省杭州市地方标准

DB3301/T1062—2018

铁皮石斛组织培养育苗技术规程

2018–06–20发布2018–06–20实施

杭州市质量技术监督局发布

I

DB3301/T1062—2018

前言

本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由杭州市农业局提出并归口。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准起草单位：浙江传化生物技术有限公司。

本标准主要起草人：米晓洁、张明奎、荣松、俞永奇。

1

DB3301/T1062—2018

铁皮石斛组织培养育苗技术规程

1范围

本标准规定了铁皮石斛制种、组培育苗、炼苗与移栽的要求及模式图。本标准适用于杭州市铁皮石斛组织培养育苗生产。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T3543（所有部分）农作物种子检验规程GB4285农药安全使用标准

DB33/T635—2015铁皮石斛生产技术规程

3术语和定义

DB33/T635—2015界定的术语和定义适用于本标准。

4制种

4.1品种选择

根据生产实际，选择优质高产并经过鉴定确认，符合GB/T3543（所有部分）要求的品种。4.2授粉

4月～6月，进行人工授粉，授粉后挂牌标记，采用物理隔绝。

4.3采收

9月～10月，当蒴果开始转黄时，选择饱满的果实采收备用。

5组培育苗

5.1蒴果消毒

蒴果经过后熟，除去表面的杂物，在超净工作台上用75%的酒精浸泡30秒，无菌水清洗干净，再放入0.5%的次氯酸钠溶液中浸泡10分钟～15分钟后，用无菌水冲洗3次～5次。

5.2种子保存

2

DB3301/T1062—2018

在超净工作台上无菌手术刀、镊子将灭菌好的蒴果剖开，将种子密封贮藏于5毫升～10毫升无菌玻璃瓶中，每瓶保存1个蒴果的种子。将装好种子的玻璃瓶置于3℃~5℃的冰箱中保存。保存4个月～6个月。

5.3萌发培养

5.3.1播种

用75%酒精擦拭装有种子的玻璃瓶表面，置于超净工作台上，用无菌镊子均匀撒播于萌发培养基中。萌发培养基的基本培养基为MS，激素和添加物配方见附录A。

5.3.2培养条件

前期暗培养15天后，光照强度12.5μmol·m-2·s-1～37.5μmol·m-2·s-1培养，光照时间8小时/天～12小时/天，培养温度为25℃±2℃。

5.4分化培养

5.4.1转接培养

培养60天～75天后，将原球茎均匀地转接到分化培养基上，分化培养基的基本培养基为MS，激素和添加物配方见附录A。

5.4.2培养条件

光照强度12.5μmol·m-2·s-1～37.5μmol·m-2·s-1，光照时间8小时/天～12小时/天，培养温度为25℃±2℃。

5.5壮苗与生根培养

5.5.1转接培养

培养60天～70天后，转接到壮苗与生根培养基上。壮苗与生根培养基的基本培养基为MS，激素和添加物配方见附录A。

5.5.2培养条件

光照强度12.5μmol·m-2·s-1～37.5μmol·m-2·s-1，光照时间8小时/天～12小时/天，培养温度为25℃±2℃。组培苗达到DB33/T635—2015中合格苗标准时，即可炼苗。

6炼苗与移栽

6.1炼苗

组培苗移栽前放置于栽培环境相近的设施大棚中，遮光率80%～85%，温度25℃~28℃,自然光闭瓶炼苗3周～4周，定期用杀菌剂消毒。杀菌液应符合GB4285规定。

6.2移栽

小心取出合格组培苗，用清水洗净培养基后，用0.1%高锰酸钾溶液浸泡3分钟～5分钟。晾干至根部发白，种植于由松麟、木屑、碎石等组成的基质中。基质在使用前应堆制发酵或高温灭菌处理。

3

DB3301/T1062—2018

7模式图

铁皮石斛组织培养育苗技术模式图见附录B。

4

DB3301/T1062—2018

附录A（资料性附录）

铁皮石斛组织培养各生长阶段培养基激素和添加物推荐配方

铁皮石斛组织培养各生长阶段培养基激素和添加物推荐配方见表A.1

表A.1铁皮石斛组织培养各生长阶段培养基激素和添加物推荐配方

主要生长阶段

培养基主要激素及添加物配方

使用方法

萌发阶段

NAA（萘乙酸）

0.1mg/l～1.0mg/l

配制母液

马铃