遗传学第十四章基因表达的调控.ppt

调节基因I的功能P328表14-1lac阻遏物的晶体结构分析阻遏物单体。阻遏物二聚体，连到两个21bp的操纵基因DNA片段。调节基因I的功能及其产物分析1操纵基因序列的突变将导致阻遏物不能识别和结合到该部位上。从而造成乳糖利用物质继续合成。如何识别突变体Oc和I-。部分二倍体实验。操纵基因（O）的确定RNA聚合酶识别和结合部位：10区：序列特征5’-TATGTT-3’35区：序列特征5’-TTTACA-3’启动子2乳糖操纵子的正调控大肠杆菌的葡萄糖效应色氨酸操纵子中基因表达时的衰减作用色氨酸操纵子的结构编码色氨酸合成相关的五个基因trpE,trpD,TrpC,TrpB,trpA；在这五个结构基因上游有启动区和操纵基因（trpO）；在第一个结构基因trpE和trpO之间，有一长达160bp的核苷酸序列，称为前导序列（L），其中含一段衰减子（A）区段。原核生物基因表达的调控大肠杆菌乳糖操纵子的调控机制大肠杆菌对乳糖的利用和酶诱导诱导作用（induction)可诱导系统（induciblesystem)与乳糖分解利用相关的酶：β-半乳糖苷酶(Z)；半乳糖透性酶(Y)；硫代半乳糖苷转乙酰基酶(A).01大肠杆菌乳糖操纵子的负调控03乳糖操纵子学说（operonhypothesis).021961，法国F.Jacob和J.Monod提出01野生型乳糖操纵子（I+O+Z+Y+A+）的负调控作用02细胞中没有乳糖时，阻遏物连到操纵基因上，阻断转录，没有酶产生。03细胞中有乳糖时，乳糖与阻遏物连接，诱导转录，产生相应的酶。相关突变体建立乳糖操纵子模型的相关实验分析Z+:能合成β-半乳糖苷酶Z-:不能合成β-半乳糖苷酶结构基因本身改变的突变体没有诱导物存在，也能进行酶合成的突变型。多发生在I基因和O基因上。组成型突变体贰壹叁01lacI-：该组成型突变使阻遏物发生改变，不能连到操纵基因区，结构基因总是处于开放状态。02lacOc：该组成型突变使操纵基因的DNA序列发生改变，不能与正常的阻遏物分子连接，结构基因处于转录状态。03超阻遏物突变体04突变株丧失合成结构基因产物的能力。05lacIs：该突变的效应与lacI-相反，产生的阻遏物分子不能与乳糖相互作用，而是连在操纵基因序列上，使结构基因转录关闭。部分二倍体分析将带调节基因的Fˊ导入E.coliF-细胞，构建不同组合的部分二倍体，比较在乳糖存在或没有乳糖时，野生型和突变型基因的活性。