饮料中4-甲基咪唑和2-甲基咪唑的测定 液相色谱-串联质谱法.docxVIP

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DBS61/0007—2022

食品安全地方标准饮料中4-甲基咪唑和2-甲基咪唑的测定液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了饮料中4-甲基咪唑和2-甲基咪唑的液相色谱-质谱/质谱的检测方法。本标准适用于饮料中4-甲基咪唑和2-甲基咪唑的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

试样中的4-甲基咪唑和2-甲基咪唑经水溶解或稀释，振荡提取后，固相萃取柱净化，液相色谱-串

联质谱法测定，内标法定量。

4试剂与材料

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1试剂

4.1.1甲醇（CH3OH,CAS:67-56-1）：色谱纯。

4.1.2乙腈（CH3CN,CAS:75-05-8）：色谱纯。

4.1.3甲酸（CH2O2,CAS:64-48-6）：色谱纯。

4.1.4甲酸铵（NH4CHO2,CAS:208-753-9）。

4.1.5氨水（NH3·H2O,CAS:1336-21-6）。

4.2溶液配制

4.2.1甲酸水溶液（2%）：准确量取2mL甲酸和98mL水，混合后备用。

4.2.2氨水甲醇溶液（5%）：准确量取5mL氨水和95mL甲醇，混合后备用。

4.2.3甲酸铵溶液（5mmol/L）：称取0.0945g甲酸铵溶解于适量水中，用水定容至300mL。

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4.2.4乙腈-5mmol/L甲酸铵溶液（9+1，体积比）：准确量取90mL乙腈和10mL5mmol/L甲酸铵溶

液（4.2.3），混合。

4.3标准品

4.3.14-甲基咪唑（4-Methylimidazole,C4H6N2,CAS:822-36-6）、2-甲基咪唑（2-Methylimidazole,C4H6N2,

CAS:693-98-1），纯度均≥98.0%。

4.3.2内标物:4-甲基咪唑-D6（4-Methylimidazole-D6,C4D6N2,CAS:1219804-79-1）：纯度≥99.0%。

4.4标准溶液配制

4.4.1标准储备液（1.0mg/mL）：称取4-甲基咪唑和2-甲基咪唑各10.0mg（精确至0.01mg），于10mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，摇匀，配制成浓度为1.0mg/mL的4-甲基咪唑、2-甲基咪唑标准储备液，-20℃避光保存，可保存6个月。

4.4.2内标储备液（1.0mg/mL）：称取4-甲基咪唑-D610.0mg（精确至0.01mg），于10mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解定容至刻度，摇匀，配制成浓度为1.0mg/mL的4-甲基咪唑-D6储备液，-20℃避光保存，可保存6个月。

4.4.3混合标准工作溶液（1.0μg/mL）：精密量取4-甲基咪唑和2-甲基咪唑标准储备液各0.25mL，于25mL容量瓶中，用乙腈-5mmol/L甲酸铵溶液（4.2.4）稀释至刻度，配制成浓度均为10.0μg/mL混合标准溶液中间液，再量取该中间液1.0mL于10mL容量瓶中，摇匀，得1.0μg/mL混合标准工作液，0℃~4℃避光保存，可保存3个月。

4.4.4内标工作溶液（1.0μg/mL）：精密量取4-甲基咪唑-D6内标储备液0.25mL，于25mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，配制成浓度为10.0μg/mL的内标标准工作溶液，再量取该中间液1.0mL于10mL容量瓶中，摇匀，得1.0μg/mL内标工作溶液。0℃~4℃避光保存，可保存3个月。

4.4.5标准曲线的制备：精密量取适量混合标准工作溶液及内标标准工作溶液，用乙腈-5mmol/L甲酸铵溶液（4.2.4）稀释配制成3.0、15.0、50.0、100.0、500.0ng/mL系列标准溶液（内标物浓度均为10.0ng/mL）。以标准溶液中被测组分峰面积和4-甲基咪唑-D6峰面积的比值为纵坐标，标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。

注：在实际样品测定中，可根据样品浓度调整标准曲线范围和内标浓度。

4.5材料

MCX固相萃取柱：60mg/3mL，或相当者，使用前依次用3mL甲醇和5mL水活化。

5仪器与设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源。

5.2分析天平：感量0.00001g和0.01g。

5.3振荡器