紫外可见分光光度计基本知识.ppt

对多种物质进行测定，常利用显色反应将被测组分转变为在一定波长范围有吸收的物质。常见的显色反应有配位反应、氧化还原反应等。显色反应条件的选择反应生成物的组成恒定。01反应生成的产物有足够的稳定性，以保证测量过程中溶液的吸光度不变；02反应有较高的选择性，即被测组分生成的化合物吸收曲线应与共存物质的吸收光谱有明显的差别；03反应的生成物必须在紫外-可见光区有较强的吸光能力，即摩尔吸光系数较大；这些显色反应，必须满足以下条件：04北京普析通用仪器有限责任公司BeijingPurkinjeGeneralInstrumentCo.,Ltd.紫外可见分光光度计基本知识

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紫外-可见分光光度法紫外-可见吸收光谱朗伯-比耳定律紫外-可见分光光度计分析条件的选择测定方法紫外-可见分光光度法(ultraviolet-visiblespectrophotometry,UV-VIS)按所吸收光的波长区域不同，分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外-可见分光光度法。它是利用物质的分子或离子对某一波长范围的光的吸收作用，对物质进行定性分析、定量分析及结构分析,所依据的光谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。精密度和准确度较高;择性好;灵敏度高;用途广泛。?与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，费用少，分析速度快;紫外-可见分光光度法的特点：紫外-可见吸收光谱物质对光的选择性吸收物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。01通过测定被测物质对不同波长的光的吸收强度（吸光度），以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，得出该物质在测定波长范围的吸收曲线。02在吸收曲线中，通常选用最大吸收波长λmax进行物质含量的测定。物质的吸收光谱与测定条件有密切的关系。测定条件（温度、溶剂极性、pH等）不同，吸收光谱的形状、吸收峰的位置、吸收强度等都可能发生变化。温度在室温范围内，温度对吸收光谱的影响不大。影响紫外-可见吸收光谱的因素溶剂注意如下几点：尽量选用低极性溶剂；能很好地溶解被测物，并且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳定性；溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。pH值设入射光强度为I0，吸收光强度为Ia,透射光强度为It，反射光强度为Ir，则I0=Ia+It+Ir由于反射光强度很弱，其影响很小，上式可简化为：I0=Ia+It吸光度和透光度朗伯-比尔定律即A=lg1/T=lgI0/It透光度：透光度为透过光的强度It与入射光强度I0之比，用T表示：即T=It/I0吸光度:为透光度倒数的对数，用A表示，朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即A=κcl式中比例常数κ与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度，l为透光液层厚度。二、朗伯-比尔定律STEP03STEP01STEP02当l以cm，c以g/L为单位，κ称为吸光系数，用a表示。A=acla的单位为L/(g.cm)三、吸光系数当l以cm，c以mol/L为单位，κ称为摩尔吸光系数，用ε表示。