【CN109810965A】一种源于知母的β葡萄糖苷酶、其编码基因、表达载体.pdfVIP

【CN109810965A】一种源于知母的β葡萄糖苷酶、其编码基因、表达载体--第1页

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(10)申请公布号CN109810965A

(43)申请公布日2019.05.28

(21)申请号201910216451.1C12N15/70(2006.01)

C12N1/21(2006.01)

(22)申请日2019.03.20

C12P33/20(2006.01)

(71)申请人广州中医药大学（广州中医药研究C12R1/19(2006.01)

院）

地址510000广东省广州市番禺区大学城

外环东路232号

(72)发明人段礼新刘中秋王丽君梁锦才

季爱加

(74)专利代理机构广州三环专利商标代理有限

公司44202

代理人颜希文宋静娜

(51)Int.Cl.

C12N9/42(2006.01)

C12N15/56(2006.01)

C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书9页

序列表4页附图6页

(54)发明名称

一种源于知母的β-葡萄糖苷酶、其编码基

因、表达载体及其应用

(57)摘要

本发明公开了一种能够特异催化呋甾皂苷

转化为螺甾皂苷的蛋白，AaF26G1，为β-葡萄糖

苷酶的一种。通过设计特定的引物，可从中药知

母植物中克隆得到该蛋白的编码基因；利用生物

工程的方法，可进一步制备得到含有该蛋白表达

基因的表达载体、重组细胞系。通过将上述重组

细胞进行扩大培养及诱导表达，可裂解得到该蛋

白的粗酶，进一步纯化可得到精酶，所得到的酶

可在体外将具有一定结构特征的呋甾皂苷转化

为螺甾皂苷。本发明提供的方法能在体外高效转

化呋甾皂苷为螺甾皂苷，相比传统的转化方法可

控性更好，效率更高，对制备改善老年痴呆症状、

A

5抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤等多种含螺甾皂苷的药

6

9物具有重要的应用价值。

0

1

8

9

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1

N

C

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【CN109810965A】一种源于知母的β葡萄糖苷酶、其编码基因、表达载体--第2页

权利要求书

CN109810965A1/1页

1.一种蛋白，名为AaF26G1，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列为a)或b)：

a)如序列SEQIDNO：1所示的氨基酸序列；

b)序列SEQIDNO：1中的氨基酸经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添

加，编码与所述蛋白相关的衍生蛋白的氨基酸序列。

2.如权利要求1所述蛋白的编码基因，其特征在于，其核苷酸序列为1)或2)或3)：

1)如序列SEQIDNO：2所示的核苷酸序列；

2)与1)限定的核苷酸序列杂交，且编码所述蛋白的核苷酸序列；

3)与1)或2)限定的序列具有90％以上同源性，且编码具有相同功能的蛋白的核苷酸序

列。