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临床检验仪器第十三章PCR核酸扩增仪习题--第1页临床检验仪器第十三章PCR核酸扩增仪习题--第1页

第十三章PCR核酸扩增仪

一、名词解释

1.PCR技术：聚合酶链反应（PCR）是一种体外核酸扩增技术。

2.TaqDNA聚合酶：存在于水生嗜热菌的嗜热DNA聚合酶，可在74℃复制DNA，

在95℃仍具有酶活力。

3.水浴锅PCR核酸扩增仪：属于第一代PCR基因扩增仪，以不同温度的水浴锅串联

成一个控温体系。

4.压缩机PCR核酸扩增仪：于第二代PCR基因扩增仪，由压缩机自动控温，金属导

热。

5.Overshooting:升温过程中，由于一些加热元件，比如半导体、金属块上积蓄的

能量仍然会传给PCR体系，造成实际的温度高于设定的温度，即overshooting现

象。

6.Undershooting：在降温过程中也会出现惯性，造成实际的温度短时间内会低于

设定温度。

7..半导体PCR核酸扩增仪：属于第三代PCR基因扩增仪，由半导体自动控温，金属

导热。

8.离心式空气加热PCR扩增仪：属于第三代PCR基因扩增仪，由金属线圈加热，采

用空气作为导热媒介。

9.梯度PCR仪：带梯度PCR功能的基因扩增仪，在反应过程中每个孔的温度控制条

件可以在指定范围内按照梯度变化，根据结果，一步就可以摸索出最适合的反应

条件。

10原位PCR仪：带原位扩增功能的基因扩增仪。

11.原位PCR技术：即在细胞内进行PCR扩增，组织细胞的形态不被破坏，是原

位杂交与PCR技术结合而形成的新技术。

12.荧光实时定量PCR技术：在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针，通过

检测荧光信号，实时监测整个PCR反应过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定

量分析。

13.位置的边缘效应：指PCR基因扩增仪最外周的样品孔温度与中间的样品孔差

异，不均一，从而导致外周样品孔的PCR扩增效率不佳。

14.模块温控模式：仪器根据探测器直接探测的承载样品金属基座温度进行控制，

该模式适用于长时间的静态孵育。

15.反应管温控模式：仪器根据探测器所探到的温控模块的温度由计算机计算出

样品管内或PCR板孔内样品液的温度来进行控制。

16.Ct值：C代表cycle,t代表threshold,Ct值的含义是，每个反应管内的荧光信号

到达设定的阈值时所经历的循环数，每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的

对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。

二、选择题

【A型题】在五个选项中选出一个最佳答案。

1.以下哪种物质在PCR反应中不需要（D）

A.TaqDNA聚合酶

B.dNTPs

C.Mg2+

D.RNA酶

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E.合适PH缓冲液

2.以下哪种酶可耐高温（A）

A.TaqDNA聚合酶

B.Hind

III

C.T4连接酶

D.RNA酶

E.Klenow片段

3.PCR反应的正确过程应为（B）

A.退火—变性—延伸

B.变性—退火—延伸

C.退火—延伸—变性

D.变性—延伸—退火

E.延伸—变性—退火

4.PCR技术的本质是（C）